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molecular2005新虫 (小有名气)
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[求助]
植物过表达载体构建-DNA与cDNA的区别
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大家好！ 我是一个老虫了，分子这一块扔了好几年了，现在又捡起来了，好多都不明白，请教一下大家啊。 我要构建植物某个基因的过表达载体，然后转入植物使该基因过量表达，进一步检测过量表达引起的生理生化指标的变化。 问题1：构建过表达载体首先要克隆基因的全长，克隆基因的全长用基因组DNA还是用cDNA？ 问题2：过表达载体直接从公司买或者向别人要带启动子的载体就可以吧？ 问题3：构建过表达载体还需要注意什么？ 求高人指点，谢谢！ |
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【答案】应助回帖
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molecular2005(myprayer代发): 金币+1, Send person rose fragrance in hand, thank you loosen one's purse strings generously, look forward to your wonderful 2013-05-31 10:56:14
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1.都可以。如果转回原种植物差别不大，转到其他植物（比如水稻的转拟南芥）似乎CDNA要稍微稳妥一些，因为有些物种的内含子剪切会有不同。 2.可以。强启动子如35S或者植物内源强启动子都行。 3.一时也想不出什么，比如读码框啊 酶切位点啊  |
2楼2013-05-30 18:19:41