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molecular2005新虫 (小有名气)
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[求助]
植物过表达载体构建-DNA与cDNA的区别
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大家好! 我是一个老虫了,分子这一块扔了好几年了,现在又捡起来了,好多都不明白,请教一下大家啊。 我要构建植物某个基因的过表达载体,然后转入植物使该基因过量表达,进一步检测过量表达引起的生理生化指标的变化。 问题1:构建过表达载体首先要克隆基因的全长,克隆基因的全长用基因组DNA还是用cDNA? 问题2:过表达载体直接从公司买或者向别人要带启动子的载体就可以吧? 问题3:构建过表达载体还需要注意什么? 求高人指点,谢谢! |
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molecular2005(myprayer代发): 金币+1, Send person rose fragrance in hand, thank you loosen one's purse strings generously, look forward to your wonderful 2013-05-31 10:56:14
molecular2005: 金币+4, ★★★很有帮助, 挺好的,谢谢 2013-07-08 16:52:38
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1.都可以。如果转回原种植物差别不大,转到其他植物(比如水稻的转拟南芥)似乎CDNA要稍微稳妥一些,因为有些物种的内含子剪切会有不同。 2.可以。强启动子如35S或者植物内源强启动子都行。 3.一时也想不出什么,比如读码框啊 酶切位点啊 |
2楼2013-05-30 18:19:41











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