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elanwong

新虫 (初入文坛)

[求助] SDS_PAGE酶谱有问题,请指教

问题描述:这两张图片是SDS_PAGE酶谱图,图2是经过刚果红染色后正常状态(就是下边分离胶颜色深,上边浓缩胶部分应该颜色很浅),但是在后来做酶谱时,刚果红染色 后,加木聚糖底物的分离胶不能染上颜色,而不加底物的浓缩胶颜色却很深,如图1(PS:扫描后的图片颜色有点失真,下边分离胶颜色其实没有那么红),这到底是为什么呀?请高人指点~~
SDS_PAGE酶谱有问题,请指教
图1.jpg


SDS_PAGE酶谱有问题,请指教-1
图2.jpg
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lizhijiang

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
elanwong: 金币+10 2013-06-04 21:14:04
我做过很多蛋白酶的酶谱,如果不出现亮带,和底物浓度有很大关系。我是在胶中加入0.5mg/ml的底物浓度。另外,Triton洗涤脱去SDS和孵育也很关键。电泳时尽量于冰浴上进行。样品不加热。尽量保持原酶活性。
海上生明月,天涯共此时!
4楼2013-06-02 21:20:54
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elanwong

新虫 (初入文坛)

求大神,快出没呀~~~~~~~~
2楼2013-05-31 09:08:24
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elanwong

新虫 (初入文坛)

怎么虫友都跑去过节了吗?求帮助啊
3楼2013-06-01 20:11:44
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elanwong

新虫 (初入文坛)

wizardfan: 以后请在试验后再对应助做出评价,以方便木虫交流 2013-06-05 07:53:36
引用回帖:
4楼: Originally posted by lizhijiang at 2013-06-02 21:20:54
我做过很多蛋白酶的酶谱,如果不出现亮带,和底物浓度有很大关系。我是在胶中加入0.5mg/ml的底物浓度。另外,Triton洗涤脱去SDS和孵育也很关键。电泳时尽量于冰浴上进行。样品不加热。尽量保持原酶活性。

谢谢,我试试~
5楼2013-06-04 21:13:46
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