24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 946  |  回复: 5

elanwong

新虫 (初入文坛)

[求助] SDS_PAGE酶谱有问题,请指教

问题描述:这两张图片是SDS_PAGE酶谱图,图2是经过刚果红染色后正常状态(就是下边分离胶颜色深,上边浓缩胶部分应该颜色很浅),但是在后来做酶谱时,刚果红染色 后,加木聚糖底物的分离胶不能染上颜色,而不加底物的浓缩胶颜色却很深,如图1(PS:扫描后的图片颜色有点失真,下边分离胶颜色其实没有那么红),这到底是为什么呀?请高人指点~~
SDS_PAGE酶谱有问题,请指教
图1.jpg


SDS_PAGE酶谱有问题,请指教-1
图2.jpg
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

elanwong

新虫 (初入文坛)

求大神,快出没呀~~~~~~~~
2楼2013-05-31 09:08:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

elanwong

新虫 (初入文坛)

怎么虫友都跑去过节了吗?求帮助啊
3楼2013-06-01 20:11:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lizhijiang

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
elanwong: 金币+10 2013-06-04 21:14:04
我做过很多蛋白酶的酶谱,如果不出现亮带,和底物浓度有很大关系。我是在胶中加入0.5mg/ml的底物浓度。另外,Triton洗涤脱去SDS和孵育也很关键。电泳时尽量于冰浴上进行。样品不加热。尽量保持原酶活性。
海上生明月,天涯共此时!
4楼2013-06-02 21:20:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

elanwong

新虫 (初入文坛)

wizardfan: 以后请在试验后再对应助做出评价,以方便木虫交流 2013-06-05 07:53:36
引用回帖:
4楼: Originally posted by lizhijiang at 2013-06-02 21:20:54
我做过很多蛋白酶的酶谱,如果不出现亮带,和底物浓度有很大关系。我是在胶中加入0.5mg/ml的底物浓度。另外,Triton洗涤脱去SDS和孵育也很关键。电泳时尽量于冰浴上进行。样品不加热。尽量保持原酶活性。

谢谢,我试试~
5楼2013-06-04 21:13:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

elanwong

新虫 (初入文坛)

我把底物浓度加大了一倍,换了个缓冲体系,效果还行!
6楼2013-06-06 13:32:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 elanwong 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 还有化工二轮调剂的学校吗 5+11 化工人999 2026-04-09 39/1950 2026-04-10 00:26 by 孙小小12457
[考研] 材料与化工300求调剂 +23 肖开文 2026-04-09 24/1200 2026-04-09 23:37 by 学员tURuqU
[考研] 一志愿085502,267分求调剂 +10 再忙也要吃饭啊 2026-04-08 11/550 2026-04-09 19:51 by gong120082
[考研] 材料专硕初试分332一志愿西北工业大学, +12 故人?? 2026-04-09 12/600 2026-04-09 18:34 by Ccclqqq
[考研] 复试调剂,一志愿郑州大学材料与化工289分 +31 硕星赴 2026-04-08 31/1550 2026-04-09 16:54 by Delta2012
[考研] 一志愿华东师范生物学326分,求调剂 +3 刘墨墨 2026-04-09 3/150 2026-04-09 16:20 by zhuimr
[考研] 085400电子信息类(川大控制工程)求调剂可跨专业 求老师联系 +3 626776879 2026-04-08 3/150 2026-04-09 16:05 by 猪会飞
[考研] 材料工程322 +18 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-07 19/950 2026-04-09 10:44 by cymywx
[考研] 调剂 +22 不逢春 2026-04-07 23/1150 2026-04-09 08:01 by Sammy2
[考研] 土木水利专硕276分求调剂 +6 我想上学!!6 2026-04-05 9/450 2026-04-08 17:45 by 宋小宝HQ
[考研] 304求调剂(085602,过四级,一志愿985) +25 化工人999 2026-04-04 26/1300 2026-04-07 22:06 by hemengdong
[考研] 22408 一志愿双一流人工智能300分 四六级,数据分析国奖 +4 zzfeng123 2026-04-06 6/300 2026-04-07 21:02 by zzfeng123
[考研] 专硕085403,291分,有两篇专利,一国一奖 +3 哈吉咪哈吉咪 2026-04-07 3/150 2026-04-07 18:21 by 蓝云思雨
[考研] 考研调剂 +7 15615482637 2026-04-04 7/350 2026-04-06 22:56 by chenzhimin
[考研] 生物与医药求调剂 +7 heguanhua 2026-04-05 8/400 2026-04-06 18:41 by macy2011
[考研] 295求调剂 +8 FZAC123 2026-04-03 8/400 2026-04-05 17:46 by 蓝云思雨
[考研] 一志愿北京化工大学,初试成绩350求调剂 +9 沿岸?贝壳 2026-04-04 14/700 2026-04-05 01:09 by 沿岸?贝壳
[考研] 085400电子信息319求调剂(接受跨专业调剂) +5 星星不眨眼喽 2026-04-03 6/300 2026-04-04 21:50 by hemengdong
[考研] 调剂0855-288 +5 x熊二a 2026-04-03 5/250 2026-04-04 00:19 by 猪会飞
[考研] 315求调剂 +6 顺理成张 2026-04-03 8/400 2026-04-03 14:04 by 百灵童888
信息提示
请填处理意见