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PITC法测氨基酸 已有1人参与
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用PITC测定标准品L-苏氨酸，衍生效果一直不好，没有出现物质峰，而且后面杂质峰特别多，不知道怎么回事，在此请教一下各位，如果你们有好的方法，麻烦发我邮箱下，谢啦！1515419055@qq.com。 溶液配制：用0.1mol/L盐酸配制500mg/L L-苏氨酸；用乙腈配制4.2g/L的PITC 测定步骤：取200uL L-苏氨酸置于1.5mL进样瓶中，再加入100uLPITC,混匀，在30℃水浴下反应1小时，然后取400uL正己烷加入，震荡充分后，静置分层，取200uL下清液，接着再取800uL纯水，最后用0.22um针式过滤器过滤，将滤液转入1.5mL进样瓶中，进样分析。 色谱条件：1.HC-C18 4.6*250mm 2.波长：254nm；柱温：38℃；流速：1mL/min 3.流动相A：0.1mol/L乙酸钠+乙腈=97：3 流动相B：乙腈+水=4+1 梯度 时间 A B 0 100 0 13 93 7 23 77 23 29 65 35 35 60 40 40 0 100 45 0 100 50 60 40 60 77 23 65 100 0  ni (2).jpg |
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