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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 综合其他 » 如何给三维支架材料上的细胞染色及使用荧光显微镜观察
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wpy890718

铁虫 (小有名气)

[求助] 如何给三维支架材料上的细胞染色及使用荧光显微镜观察

我是用静电纺丝的方法制备的三维细胞培养支架,现在给细胞染色后,在荧光显微镜下观察不清楚细胞形态,而且整个背底不是黑的,而是亮的和细胞差不多一个颜色,纤维也可以看清,不知道是染色问题,还是做片子的问题
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1楼 2013-05-23 21:16:08
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心朗天晴

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
红舟流星: 金币+1, 欢迎来生物材料板块应助交流 2013-05-23 23:44:09
wpy890718: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-05-24 14:47:38
是不是染料本身可与纤维结合，或者染色时间过长or染色后洗涤不充分？而且有水存在条件下，背景一般都不会是黑的
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酱油打太多~
2楼2013-05-23 22:54:01
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bearbear507

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
红舟流星: 金币+1, 欢迎来生物材料板块应助交流 2013-05-24 06:41:33
你的材料是蛋白材料或者是多糖材料吗？有时候染色剂会跟材料发生结合，那么材料也被染上了，背景就会很亮，跟细胞差不多。
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3楼2013-05-24 00:19:52
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yifeng1206

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
红舟流星: 金币+1, 欢迎来生物材料板块应助交流 2013-05-24 21:43:40
有些材料吸附抗体很厉害，或者本身就auto-fluorescent，染色的每一步换液都多多洗几遍，
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4楼2013-05-24 07:16:22
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wpy890718

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 心朗天晴 at 2013-05-23 22:54:01
是不是染料本身可与纤维结合，或者染色时间过长or染色后洗涤不充分？而且有水存在条件下，背景一般都不会是黑的

那是样品固定完后染色之后,要干燥吗?但是封片子的时候用甘油,样品还是会湿啊
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5楼2013-05-24 14:51:31
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心朗天晴

银虫 (小有名气)
样品染色后，多洗几遍，洗的时候可以用滤纸吸水，拍的时候可以把曝光时间调短一点。不封片也可以啊
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酱油打太多~
6楼2013-05-24 15:41:42
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晚香玉

木虫 (正式写手)
肯定是没洗干净，不要怕细胞被洗掉了，多洗几遍，每次多浸泡几分钟！
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7楼2013-05-24 16:04:23
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心朗天晴

银虫 (小有名气)
楼主同学，既然是三维培养，染色后只看荧光，怎么看细胞是否长入支架内呢？
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酱油打太多~
8楼2013-06-03 16:19:03
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红舟流星

荣誉版主 (文坛精英)

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引用回帖:
8楼: Originally posted by 心朗天晴 at 2013-06-03 16:19:03
楼主同学，既然是三维培养，染色后只看荧光，怎么看细胞是否长入支架内呢？

可以看断面啊
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红楼一梦终难寻扁舟载酒且慢行落花流水依惜别月伴明星照前路
9楼2013-06-03 21:51:57
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wpy890718

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 红舟流星 at 2013-06-03 21:51:57
可以看断面啊...

请问你是做组织切片吗?
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10楼2013-08-30 11:44:15
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