| 查看: 954 | 回复: 4 | ||
[求助]
miRNA做完荧光定量需要跑焦吗？
|
|
我反转录时用的颈环引物，real-time用的Taqman探针，特异性方面应该没问题吧，但是做了一个无模板对照竟然也有产物，所以其他的结果也都不可靠了，就想跑焦看一下片段长度。（虽然也可能是样太多我加错了，不过可能性不大） 但是跑焦的话目的片段应该是有多长呢？用的产品里面没有说明各种引物的长度，我查了一些别人做的引物设计，好像最终结果是比原有的miRNA长40bp，是这样吗？ 还有就是用聚丙烯酰胺凝胶电泳的话多大浓度合适？ 在此请教各位，望不吝赐教，谢谢！！ |
回复此楼» 猜你喜欢
为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种?
已经有5人回复
-
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》
已经有3人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有178人回复
-
求助 食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社 电子版
已经有5人回复
-
胶体几丁质的结晶度？
已经有0人回复
-
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士
已经有2人回复
-
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线
已经有5人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
跑荧光定量PCR，目的基因都是NA，内参基因均跑出来了，请问是怎么回事？
已经有14人回复- 求助求助！！！不同大鼠的同一基因的荧光定量实时PCR实验是否需要设计不同的引物
已经有8人回复
- 定量PCR读取荧光值的步骤需要保持多长时间？
已经有12人回复
- 为什么荧光定量后还要跑电泳呢
已经有15人回复
- 荧光定量需要3个重复样本吗
已经有12人回复
- miRNA双荧光报告基因实验筛选靶基因及细胞功能学研究资料---miR21文献
已经有106人回复
bullfrog325
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 193 (高中生)
- 金币: 2880.3
- 散金: 200
- 红花: 24
- 帖子: 744
- 在线: 269.5小时
- 虫号: 1864929
- 注册: 2012-06-20
2楼2013-05-16 17:25:33
3楼2013-05-16 19:01:49
bullfrog325
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 193 (高中生)
- 金币: 2880.3
- 散金: 200
- 红花: 24
- 帖子: 744
- 在线: 269.5小时
- 虫号: 1864929
- 注册: 2012-06-20
【答案】应助回帖
★ ★
amisking: 金币+2, 鼓励积极发帖帮助解答问题。 2013-05-16 22:46:43
amisking: 金币+2, 鼓励积极发帖帮助解答问题。 2013-05-16 22:46:43
|
楼主这个不像是引物啊, 像是一个miRNA前体. 你可以把你的"引物"序列用网上预测RNA折叠的工具看看, 比如: http://rna.tbi.univie.ac.at/cgi-bin/RNAfold.cgi |
4楼2013-05-16 20:30:56
5楼2013-05-17 14:47:26