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miRNA做完荧光定量需要跑焦吗？
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我反转录时用的颈环引物，real-time用的Taqman探针，特异性方面应该没问题吧，但是做了一个无模板对照竟然也有产物，所以其他的结果也都不可靠了，就想跑焦看一下片段长度。（虽然也可能是样太多我加错了，不过可能性不大） 但是跑焦的话目的片段应该是有多长呢？用的产品里面没有说明各种引物的长度，我查了一些别人做的引物设计，好像最终结果是比原有的miRNA长40bp，是这样吗？ 还有就是用聚丙烯酰胺凝胶电泳的话多大浓度合适？ 在此请教各位，望不吝赐教，谢谢！！ |
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5楼2013-05-17 14:47:26
bullfrog325
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2楼2013-05-16 17:25:33
3楼2013-05-16 19:01:49
bullfrog325
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【答案】应助回帖
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amisking: 金币+2, 鼓励积极发帖帮助解答问题。 2013-05-16 22:46:43
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楼主这个不像是引物啊, 像是一个miRNA前体. 你可以把你的"引物"序列用网上预测RNA折叠的工具看看, 比如: http://rna.tbi.univie.ac.at/cgi-bin/RNAfold.cgi |
4楼2013-05-16 20:30:56
10