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助啊，为什么我的microrRNA提不出来啊？？？为什么啊？
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1. 液氮研磨后加入Trizol提取，氯仿抽提，异丙醇沉淀，酒精洗脱。 2. RNA跑胶检测无降解无蛋白质污染 3. 反转录16微RNA+1.6微反转录引物 反转录体系：M-MLV 1微 Buffer 5微 DNTP 1.3微 RNASE 0.7微 反转录程序：16度 30min (30度 30s 42度 30s 50度 1s )60个循环 70度 5min miR952 序列 AACGAGGATCCATTGGAG 茎环引物5'gtcgtatccagtgcagggtccgaggtattcgcactggatacgacCTCCAA 3' 正向引物GCCGCAACGAGGATCCA 通用反向引物gtgcagggtccgaggt 这是我的体系，大家帮我看看为什么扩增不出来啊？我是提了rna直接扩增的。提了好多次都扩增不出来，大家帮我看看是哪里出问题了啊？？？谢谢啊！ |
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chlorella409
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