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助啊,为什么我的microrRNA提不出来啊???为什么啊?
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1. 液氮研磨后加入Trizol提取,氯仿抽提,异丙醇沉淀,酒精洗脱。 2. RNA跑胶检测无降解无蛋白质污染 3. 反转录16微RNA+1.6微反转录引物 反转录体系:M-MLV 1微 Buffer 5微 DNTP 1.3微 RNASE 0.7微 反转录程序:16度 30min (30度 30s 42度 30s 50度 1s )60个循环 70度 5min miR952 序列 AACGAGGATCCATTGGAG 茎环引物5'gtcgtatccagtgcagggtccgaggtattcgcactggatacgacCTCCAA 3' 正向引物GCCGCAACGAGGATCCA 通用反向引物gtgcagggtccgaggt 这是我的体系,大家帮我看看为什么扩增不出来啊?我是提了rna直接扩增的。提了好多次都扩增不出来,大家帮我看看是哪里出问题了啊???谢谢啊! |
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4楼2013-05-14 18:16:08
2楼2013-05-14 16:47:54
chlorella409
木虫 (正式写手)
- 应助: 88 (初中生)
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- 专业: 蛋白质组学
3楼2013-05-14 17:04:42
5楼2013-05-14 18:17:24












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