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清秀杨

新虫 (初入文坛)

[求助] 低拷贝的质粒如何长期保存

各位童鞋,我现在要保存10e4拷贝的质粒,因为浓度很低,且要经常使用,需保存至少一年,不知各位有没有好的方法介绍一下。这个问题急需解决,希望各位童鞋能够多多帮忙。
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stevenshi021

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
清秀杨(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-10 13:04:31
这个有什么特别之处吗,所有的质粒DNA保存方法不都是一样的吗。在抽提时候可以起始菌多一点上柱子,这样得到的DNA就会多点,想多要就用midi柱子了。长期保存半边,水洗TE都是可以的。不知道楼主想问什么,搞得我不知道怎么解答这个帖子。
祝你好运
2楼2013-05-10 11:03:35
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清秀杨

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by stevenshi021 at 2013-05-10 11:03:35
这个有什么特别之处吗,所有的质粒DNA保存方法不都是一样的吗。在抽提时候可以起始菌多一点上柱子,这样得到的DNA就会多点,想多要就用midi柱子了。长期保存半边,水洗TE都是可以的。不知道楼主想问什么 ...

我就是想找个能长期保存拷贝数为10000的质粒,你上面说的这些我都知道。
性格决定人生,选择决定命运
3楼2013-05-23 08:58:22
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stevenshi021

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你这个问题本身就有问题,质粒的拷贝数不是你能控制的与保存方法没有关系。质粒拷贝数是基于质粒的复制子,你要想将现在的质粒变成高拷贝那么就要对质粒进行改造,我想没有必要。得到同样量的质粒多摇点菌。我对楼主的问题还是费解,不知道我回答了你的问题了吗?
4楼2013-05-23 10:16:24
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sxxuan

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

1*TE,pH7.5~8.0左右
分装成很多小份,冻存在-20或以下,每次用的时候拿出来一份,尽量避免反复冻融
你的日子如何,你的力量也必如何!
5楼2013-05-23 10:42:23
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