应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 关于稀释平板计数法的疑问
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
171/2返回列表12下一页
查看: 4569  |  回复: 16
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

襄阳蓉儿

新虫 (小有名气)

[求助] 关于稀释平板计数法的疑问

1.我用的浇注法，应该24h计数还是48h计数？
2.长了24h后培养基表面的菌落很明显，但是培养基内部的菌就是一个小点点，很难看到，稀释倍数低的平板像是10倍100倍1000倍几乎全部都是一个点一个点大片大片的挺均匀根本看不清。这时该怎么计数呢？稀释度高的培养基内部也有一些点点，是表面和内部的都记上去吗？
3.我一共做了7个梯度的十倍稀释。原菌液倒平板之前的OD是1.13了，稀释十倍之后变成0.13，稀释100倍是0.01，1000居然变成0了，后面的稀释度也是0左右。那这么看来菌液里的菌很少很少很少了，可是为什么平板计数后后面OD值是0的菌长出来的菌落还挺多啊，不数那些点点就差不多在30-300之间，数了差不多1000以上了。。。。
不懂怎么计数。我是想做一个CFU与OD之间关系的曲线来着。

是不是该等平板培养一段时间的同时要将相应稀释倍数的菌同等条件培养呢？是不是菌在平板里扩大培养了所以之前测的OD值是不对的？

[ Last edited by 襄阳蓉儿 on 2013-4-28 at 11:46 ]
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

无菌检查

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
少壮不努力，长大pcr
1楼 2013-04-28 11:28:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

bingge880306

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+5, 鼓励交流应助！ 2013-05-03 20:31:36
关于第一个问题，24小时应该就可以了，时间太长菌落数就难以确定了，后期就都长在一起了，而且后期也有抑制作用了
第二个问题其实都做几个平行试验就可以了，不用计数稀释度低的吧，只要把稀释到最后的菌落数合适的那个梯度多做几个平行试验不就可以倒推回原菌落数吗
第三个问题可能你的操作不当，在空气中就染菌了，是在酒精灯范围内操作的吗？应在酒精的火焰周围15厘米的范围内操作才可以保证不染菌。
希望能帮到你啊
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2013-04-28 13:59:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zjm104273

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+5, good！ 2013-05-03 20:31:15
1、你培养的是什么微生物?计数一般选择对数生长期，例如大肠杆菌通常24小时左右就可以进行菌落计数了。
2. 菌落计数应该是所有菌落均做统计，如果你觉得通过浇注法内部与表面有干扰，可考虑通过涂布的方法计数。计数时不是平板上长多少就计多少的，菌液浓度越大，几个细胞长出一个菌落，或者甚至菌落连成菌苔，根本没法计数，即使数出来也不准确，我们通常对于一个样品会选择几个不同的稀释度，涂平板以后，选择生长菌落数在30-200左右的平板计数，然后再乘以稀释倍数得到原始样品的浓度，菌落数太多计数值偏小，菌落数太少随机性太大，很不准确。
3、你讨论浓度和OD值关系的时应选择一定范围，不是从0开始，大概10的5次方到8次方左右吧，浓度低的话OD值肯定趋近与0的，浓度太高的话两者关系不再近乎线性。。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2013-04-29 19:01:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

襄阳蓉儿

新虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 菜鸟一点红 at 2013-05-02 10:37:26
测0D值，你是用的无菌水稀释还是培养基稀释的，我最近也在做类似试验，测OD值得，用无菌水作为对照是不是不合理啊，还是用培养基呢

我使用培养基稀释的，多多交流哈
赞一下(1人) 回复此楼
少壮不努力，长大pcr
11楼2013-05-02 11:08:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

襄阳蓉儿

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by bingge880306 at 2013-04-28 13:59:48
关于第一个问题，24小时应该就可以了，时间太长菌落数就难以确定了，后期就都长在一起了，而且后期也有抑制作用了
第二个问题其实都做几个平行试验就可以了，不用计数稀释度低的吧，只要把稀释到最后的菌落数合适的 ...

谢谢你
2.倒推的意思是，假如说我的第五个十倍稀释是50个菌落，那倒退回第四个十倍稀释就是500个？
3.你的意思是说培养基内部的小点点是杂菌？不会吧，因为高浓度菌液长出来的是很密密麻麻的小点点，我是倾注平板不是涂布平板所以培养基内部也会有菌的吧？
赞一下 回复此楼
少壮不努力，长大pcr
3楼2013-04-28 14:30:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bingge880306

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

2.对呀
3.换个培养基试试呢
赞一下 回复此楼
4楼2013-04-28 19:40:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bingge880306

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

那是不是因为菌的兼性厌氧和好氧的问题呢
赞一下 回复此楼
5楼2013-04-28 19:55:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

襄阳蓉儿

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by zjm104273 at 2013-04-29 19:01:16
1、你培养的是什么微生物?计数一般选择对数生长期，例如大肠杆菌通常24小时左右就可以进行菌落计数了。
2. 菌落计数应该是所有菌落均做统计，如果你觉得通过浇注法内部与表面有干扰，可考虑通过涂布的方法计数。计 ...

可是我纠结的是我每次做实验之前都要确保CFU在10的6次方，要是每次都这么数一次，那就是把前一天铺平板的菌液倒平板之后保存在4度吗？然后等第二天长出来再计数选择哪个稀释度的菌液吗？
赞一下 回复此楼
少壮不努力，长大pcr
7楼2013-05-02 09:58:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

襄阳蓉儿

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by bingge880306 at 2013-04-28 19:55:03
那是不是因为菌的兼性厌氧和好氧的问题呢

我觉得是的，但是不知道该不该计算进去
赞一下 回复此楼
少壮不努力，长大pcr
8楼2013-05-02 09:59:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

襄阳蓉儿

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by zjm104273 at 2013-04-29 19:01:16
1、你培养的是什么微生物?计数一般选择对数生长期，例如大肠杆菌通常24小时左右就可以进行菌落计数了。
2. 菌落计数应该是所有菌落均做统计，如果你觉得通过浇注法内部与表面有干扰，可考虑通过涂布的方法计数。计 ...

2.我稀释第7个10倍数出来的是100个菌落，每个平板接种的是0.2ml那计算公式应该是100*5*10（7次方）=5*10（9次方），那就是原菌液是这个浓度的是吧，那我需要1*10（6次方），这个是不是把我的原菌液稀释5000倍，是这个意思吗？
3.我的第7个10倍稀释出来的输出来的菌落都那么多，OD还是0这没法儿在稀释了吧？
赞一下 回复此楼
少壮不努力，长大pcr
9楼2013-05-02 10:23:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

菜鸟一点红

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

测0D值，你是用的无菌水稀释还是培养基稀释的，我最近也在做类似试验，测OD值得，用无菌水作为对照是不是不合理啊，还是用培养基呢
赞一下 回复此楼
10楼2013-05-02 10:37:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 襄阳蓉儿 的主题更新
171/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料科学与工程320求调剂，080500 +9 黄瓜味薯片 2026-04-06 9/450 2026-04-08 00:46 by JourneyLucky
[考研] 323求调剂 +3 林zlu 2026-04-07 4/200 2026-04-07 23:21 by lbsjt
[考研] 化工学硕 285求调剂 +23 Wisjxn 2026-04-07 23/1150 2026-04-07 22:55 by JourneyLucky
[考研] 0854电子信息319求调剂（接受跨专业调剂） +5 星星不眨眼喽 2026-04-05 6/300 2026-04-07 22:16 by hemengdong
[考研] 0702物理学学硕299求调剂 +3 祁柒连 2026-04-06 3/150 2026-04-07 12:48 by 小木虫gyh
[考研] 081200-11408-367学硕求调剂 +4 1_2_3111 2026-04-06 4/200 2026-04-07 08:13 by jp9609
[考研] 318求调剂 +12 ykyhsa 2026-04-05 14/700 2026-04-06 17:46 by fuyu_
[考研] 0817化学工程与技术求调剂，一志愿中海洋319 +14 lv945 2026-04-04 14/700 2026-04-06 10:20 by 蓝云思雨
[考研] 求调剂，一志愿郑州大学材料与化工专硕，英二数二342分，求老师收留 +19 v12abo 2026-04-02 21/1050 2026-04-06 09:29 by 蓝云思雨
[考研] 材料334求调剂 +19 Eecho# 2026-04-03 19/950 2026-04-06 08:37 by 小小树2024
[考研] 298求调剂 +5 zzz，，r 2026-04-02 8/400 2026-04-04 19:55 by 蓝云思雨
[考研] 求调剂 +3 ffyyu 2026-04-02 3/150 2026-04-04 19:03 by 蓝云思雨
[考研] 357求调剂 +13 1050389037 2026-04-03 13/650 2026-04-03 22:27 by 无际的草原
[考研] 一志愿北京交通大学材料工程总分358 +4 cs0106 2026-04-03 4/200 2026-04-03 13:41 by 百灵童888
[考研] 一志愿深大085601材料工程专业（专硕）300分可以调剂去哪 +8 10160315 2026-04-02 8/400 2026-04-03 09:36 by hypershenger
[考研] 283求调剂 +3 jiouuu 2026-04-02 4/200 2026-04-02 14:08 by 哒哒哒呱呱呱
[考研] 一志愿9初试366 本双非求调剂 +4 运气来得若有似� 2026-04-02 4/200 2026-04-02 09:56 by guanxin1001
[考研] 0710生物学，325求调剂 +3 mkkkkkl 2026-04-01 3/150 2026-04-02 09:48 by Jaylen.
[考研] 化学工程专硕324分，一志愿中国矿业大学求调剂 +7 耿耿1314 2026-04-01 7/350 2026-04-02 07:40 by 尚水阁主
[考研] 生物学327，求调剂 +5 书上的梅子 2026-04-01 6/300 2026-04-02 06:47 by ilovexiaobin
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭