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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 水产品、畜产品 » 超氧阴离子清除氯的测定
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wenwen3537

铜虫 (初入文坛)

[求助] 超氧阴离子清除氯的测定 已有1人参与

想问一下，磷苯三酚法测定是不是通过斜率来计算的？为什么我做出来的对照组的斜率要比样品组的小？
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1楼 2013-04-23 22:56:36
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user59888

金虫 (文坛精英)

宫创始人 ------小妮

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
原理
利用邻苯三酚在弱碱性介质中会自身氧化分解产生有色中间物和O2•-：
O2•-对自氧化又起催化作用，此有色物质在325nm处有最大吸收波长，依据有色中间物的生成量，判断O2•-的生成量。若体系中加入清除O2•-的物质，则会减少有色物质的生成，吸光度降低。吸光度越低，清除O2•-的效果越好。
方法：
取一定体积的样品溶液，以蒸馏水定容为1.0mL，加入3mL Tris-HCl (pH=8.2)，25℃水浴20 min后，加入100μL 10mmol/L邻苯三酚，精确反应4min，滴入100μL 6mol/LHCl终止反应，在325nm处测定吸光值。每个试验作3个平行样。空白组以蒸馏水代替样品溶液。以抗坏血酸作为参比物，考察样品清除O2•-的能力。
清除率计算公式：
超氧阴离子清除率S2(%)=(A空白－A样品) /A空白×100%。
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此人已死，没烧纸的半夜出来喝酒
2楼2013-04-23 23:45:56
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wenwen3537

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by user59888 at 2013-04-23 23:45:56
原理
利用邻苯三酚在弱碱性介质中会自身氧化分解产生有色中间物和O2•-：
O2•-对自氧化又起催化作用，此有色物质在325nm处有最大吸收波长，依据有色中间物的生成量，判断O2•-的生成量。若体系中 ...

可是我想知道为什么我做出来的是负值啊 这不科学啊！
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3楼2013-04-24 08:38:18
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dreamchen

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

同问  算出负值 这怎么意思啊
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4楼2013-04-28 13:23:05
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不死鸟笑笑

新虫 (初入文坛)
和楼上出现同样的问题，表示很焦虑啊。。。
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尽力做力所能及的事
5楼2014-03-13 16:40:49
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sherlockdx

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by user59888 at 2013-04-23 23:45:56
原理
利用邻苯三酚在弱碱性介质中会自身氧化分解产生有色中间物和O2•-：
O2•-对自氧化又起催化作用，此有色物质在325nm处有最大吸收波长，依据有色中间物的生成量，判断O2•-的生成量。若体系中 ...

大神  我的样液有颜色哦。。。所以只能采取自氧化法测动态斜率哦。。。。。。。。。但是空白的斜率总是弧线。。。有时又会比样品小
重复性很差 怎么破
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6楼2014-07-21 10:40:12
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merryqkx

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我用的抗超氧阴离子自由基测试试剂盒，测出样品的吸光值也是大于对照的，难道说我的样品并不能抗超氧阴离子，反而会产生超氧阴离子吗？明明是测定抗氧化活性的，苦恼啊！
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7楼2016-01-23 15:12:26
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不倒翁X

新虫 (小有名气)
我最近也做了，和你同样的问题，而且实验重现性很差。准备用ESR（电子顺磁自旋共振法）做，但是设备正在寻求中。。。。。这算是侧清除自由基最有效直接的方法之一吧，多多交流啊
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8楼2016-02-20 22:25:07
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smilyljq

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by user59888 at 2013-04-23 23:45:56
原理
利用邻苯三酚在弱碱性介质中会自身氧化分解产生有色中间物和O2•-：
O2•-对自氧化又起催化作用，此有色物质在325nm处有最大吸收波长，依据有色中间物的生成量，判断O2•-的生成量。若体系中 ...

你好 我用抗坏血酸做参照物还正常，但是我的样品做出来比空白组吸光度还高，不明白为什么，望指点！
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9楼2016-03-28 16:08:33
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