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wenwen3537

铜虫 (初入文坛)

[求助] 超氧阴离子清除氯的测定 已有1人参与

想问一下,磷苯三酚法测定是不是通过斜率来计算的?为什么我做出来的对照组的斜率要比样品组的小?
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user59888

金虫 (文坛精英)

宫创始人 ------小妮

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
原理
利用邻苯三酚在弱碱性介质中会自身氧化分解产生有色中间物和O2•-:
O2•-对自氧化又起催化作用,此有色物质在325nm处有最大吸收波长,依据有色中间物的生成量,判断O2•-的生成量。若体系中加入清除O2•-的物质,则会减少有色物质的生成,吸光度降低。吸光度越低,清除O2•-的效果越好。
方法:
取一定体积的样品溶液,以蒸馏水定容为1.0mL,加入3mL Tris-HCl (pH=8.2),25℃水浴20 min后,加入100μL 10mmol/L邻苯三酚,精确反应4min,滴入100μL 6mol/LHCl终止反应,在325nm处测定吸光值。每个试验作3个平行样。空白组以蒸馏水代替样品溶液。以抗坏血酸作为参比物,考察样品清除O2•-的能力。
清除率计算公式:
超氧阴离子清除率S2(%)=(A空白-A样品) /A空白×100%。
此人已死,没烧纸的半夜出来喝酒
2楼2013-04-23 23:45:56
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wenwen3537

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by user59888 at 2013-04-23 23:45:56
原理
利用邻苯三酚在弱碱性介质中会自身氧化分解产生有色中间物和O2•-:
O2•-对自氧化又起催化作用,此有色物质在325nm处有最大吸收波长,依据有色中间物的生成量,判断O2•-的生成量。若体系中 ...

可是我想知道为什么我做出来的是负值啊 这不科学啊!
3楼2013-04-24 08:38:18
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dreamchen

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

同问  算出负值 这怎么意思啊
4楼2013-04-28 13:23:05
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不死鸟笑笑

新虫 (初入文坛)

和楼上出现同样的问题,表示很焦虑啊。。。
尽力做力所能及的事
5楼2014-03-13 16:40:49
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sherlockdx

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by user59888 at 2013-04-23 23:45:56
原理
利用邻苯三酚在弱碱性介质中会自身氧化分解产生有色中间物和O2•-:
O2•-对自氧化又起催化作用,此有色物质在325nm处有最大吸收波长,依据有色中间物的生成量,判断O2•-的生成量。若体系中 ...

大神  我的样液有颜色哦。。。所以只能采取自氧化法测动态斜率哦。。。。。。。。。但是空白的斜率总是弧线。。。有时又会比样品小
重复性很差 怎么破
6楼2014-07-21 10:40:12
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merryqkx

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我用的抗超氧阴离子自由基测试试剂盒,测出样品的吸光值也是大于对照的,难道说我的样品并不能抗超氧阴离子,反而会产生超氧阴离子吗?明明是测定抗氧化活性的,苦恼啊!
7楼2016-01-23 15:12:26
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不倒翁X

新虫 (小有名气)

我最近也做了,和你同样的问题,而且实验重现性很差。准备用ESR(电子顺磁自旋共振法)做,但是设备正在寻求中。。。。。这算是侧清除自由基最有效直接的方法之一吧,多多交流啊
8楼2016-02-20 22:25:07
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smilyljq

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by user59888 at 2013-04-23 23:45:56
原理
利用邻苯三酚在弱碱性介质中会自身氧化分解产生有色中间物和O2•-:
O2•-对自氧化又起催化作用,此有色物质在325nm处有最大吸收波长,依据有色中间物的生成量,判断O2•-的生成量。若体系中 ...

你好 我用抗坏血酸做参照物还正常,但是我的样品做出来比空白组吸光度还高,不明白为什么,望指点!
9楼2016-03-28 16:08:33
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