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flyyang109

铜虫 (小有名气)

[求助] 关于半乳糖诱导的问题

小弟在实验中用到半乳糖诱导酿酒酵母(YPD培养基)时,结果发现未诱导和诱导的菌液上清跑SDS-PAGE都有目的条带(位置大小一致),宿主菌没有。有没有虫友帮忙解答下这是什么原因。跟YPD培养基有关吗?灭菌时会有半乳糖生成吗?求解答 谢谢!
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xikexiao

禁虫 (小有名气)


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,鼓励应助,分子生物版块期待你的更多精彩。 2013-04-23 12:25:45
本帖内容被屏蔽

2楼2013-04-22 16:48:06
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flyyang109

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xikexiao at 2013-04-22 16:48:06
能否上传一下sds-page的照片,你确定是半乳糖诱导的,或者还有其他可以诱导的。比如说iptg也可以替换成乳糖之类的

质粒是pYES2.0  IPTG也可以的,但跟半乳糖诱导是否有区别呢
第一道是宿主菌,二道是重组菌未诱导。3、4、5、6是不同诱导时间的,帮忙解答下。

SDS-1.jpg

3楼2013-04-23 10:12:59
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flyyang109

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xikexiao at 2013-04-22 16:48:06
能否上传一下sds-page的照片,你确定是半乳糖诱导的,或者还有其他可以诱导的。比如说iptg也可以替换成乳糖之类的

蛋白大小在24kda左右
4楼2013-04-23 10:13:56
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xikexiao

禁虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
myprayer: 金币+5, 赠人玫瑰手有余香。期待你的慷慨解囊。快乐每一天鼓励新虫子来到生物版块交流,期待你的精彩1 2013-04-23 12:26:10
flyyang109: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-04-24 12:02:45
本帖内容被屏蔽

5楼2013-04-23 10:28:50
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flyyang109

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by xikexiao at 2013-04-23 10:28:50
你配YPD的时候,把2%的葡萄糖换成2%的半乳糖,就是葡萄糖不要加了,试试看。用半乳糖直接作为碳源

谢谢  我试下吧
6楼2013-04-24 12:03:04
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