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roy5513

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于Tricine SDS PAGE

我想求助一下 tricine电泳配置的各种缓冲液和储存液   配置好了以后还需要过滤吗?跑Tricine SDS PAGE的时候有什么注意事项吗?希望大神指导~~~感激不尽~~~
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ycufb

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香。期待你的慷慨解囊。快乐每一天 2013-04-18 08:22:39
roy5513: 金币+5 2013-04-22 10:41:52
进口试剂不用过滤,国产的强烈建议过滤。我跑过tricine,那个好像是用于看分子量少于10kb的蛋白的,如果是大于10kb,貌似不需要tricine。我7.8kb的蛋白都用那个普通PAGE跑过,没问题。跑这个我记得是电压刚开始小点,蛋白浓缩之后再加电压,你可以试一试。很久之前了,你可以做一下尝试。另祝实验顺利。
2楼2013-04-17 23:01:24
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roy5513

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ycufb at 2013-04-17 23:01:24
进口试剂不用过滤,国产的强烈建议过滤。我跑过tricine,那个好像是用于看分子量少于10kb的蛋白的,如果是大于10kb,貌似不需要tricine。我7.8kb的蛋白都用那个普通PAGE跑过,没问题。跑这个我记得是电压刚开始小点 ...

谢谢您的建议  我的蛋白也不到8  但是用普通的sds page跑的时候小分子的带都弥散了  效果不好  所以改成tricine的
3楼2013-04-22 10:41:33
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ycufb

银虫 (小有名气)

你用15%普通page完全没问题的,你可以试试。tricine太麻烦了,呵呵。
4楼2013-04-22 15:17:02
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静静秋

木虫 (正式写手)

Tricine胶跑的时候要注意控制电压和温度,我是先用30V跑大概40min,然后再用150V跑完;
电压增大以后温度会升高,我都是直接放在4℃的冷冻柜中跑;
染色液和脱色液可以直接用普通胶的,我试过了,没有影响,但是注意染色和脱色的时间都不要过长
但愿,我的天空一直蔚蓝
5楼2013-05-27 09:56:21
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