24小时热门版块排行榜    

查看: 879  |  回复: 7

aqp2

新虫 (初入文坛)

[求助] 这个pcr图片可以说明什么?应在哪方面改进?

各位老师,学长学姐们你们好:
   我是个pcr新手,以下是我的pcr图片,你们能帮我看看是哪出问题了吗?我只有15个金币,都给你们了。
这个是rna,图片1;这个是pcr的,图片2;谢谢。
回复此楼

» 本帖附件资源列表

  • 欢迎监督和反馈:小木虫仅提供交流平台,不对该内容负责。
    本内容由用户自主发布,如果其内容涉及到知识产权问题,其责任在于用户本人,如对版权有异议,请联系邮箱:xiaomuchong@tal.com
  • 附件 1 : 图片1.bmp
  • 2013-04-14 17:25:11, 306.3 K
  • 附件 2 : 图片2.bmp
  • 2013-04-14 17:25:21, 313.89 K

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖置顶 ( 共有1个 )

ptzhyding06

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+3, 鼓励积极发帖帮助解答问题。 2013-04-14 21:01:02
amisking: 回帖置顶 2013-04-14 21:01:05
RNA跑出来应该是3条带 三种RNA 隐约可以看到前面的两条但是不够明亮  貌似提的RNA质量不是很好 不过可以试试提胶浓度调整电泳时间把曝光强度的再调整的低点 可能会有好一点的效果
PCR的话貌似没有看到明显的条带,貌似是没有扩增出来或者是DNA量太低照的不明显,试试稍微降低一点退火温度增加循环数再看看是不是会有好一点的结果
祝实验顺利
2楼2013-04-14 18:51:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励应助! 2013-04-23 14:32:52
你的意思是先提RNA,然后反转录,以cDNA为模板做PCR吗?如果是这样,你的RNA质量不怎么好,里面有很多杂质,没有明显的RNA带。RNA样品消化DNA了吗?PCR没P出来,不能确定是否是模板的问题,这种情况下,最好做一下正对照,1用同样的引物P基因组DNA,2用cDNA模板扩增其它基因(比方说house keeping基因)。
3楼2013-04-15 00:41:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aqp2

新虫 (初入文坛)

我回去试试
4楼2013-04-15 18:05:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

panyuzhu

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

5楼2013-04-18 21:07:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aqp2

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ptzhyding06 at 2013-04-14 18:51:34
RNA跑出来应该是3条带 三种RNA 隐约可以看到前面的两条但是不够明亮  貌似提的RNA质量不是很好 不过可以试试提胶浓度调整电泳时间把曝光强度的再调整的低点 可能会有好一点的效果
PCR的话貌似没有看到明显的条带, ...

我对退火温度进行了梯度试验,我的目标条带退火温度为57.8度,我设的梯度为50 55 60,25微升体系,30个循环,结果和上面的一样。
麻烦问下,总rna在做反转录时加样量是怎样计算的?谢谢
6楼2013-04-21 18:35:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ptzhyding06

铜虫 (初入文坛)


aqp2(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-04 01:49:58
引用回帖:
6楼: Originally posted by aqp2 at 2013-04-21 18:35:19
我对退火温度进行了梯度试验,我的目标条带退火温度为57.8度,我设的梯度为50 55 60,25微升体系,30个循环,结果和上面的一样。
麻烦问下,总rna在做反转录时加样量是怎样计算的?谢谢...

那个浓度是按试剂盒的说明来加的 测定的时候是用的Enpendof的蛋白核酸检测仪
一般在提取RNA后都会检验一下RNA A260/A280的比值吧
如果PCR条件确实没有问题话,是不是可以再确认一下引物这块有没有问题或者多加点cDNA
7楼2013-04-23 09:43:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aqp2

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
请问楼主rt产物能不能通过跑胶看看确定下rt成功否
8楼2013-05-02 21:04:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 aqp2 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +12 羊腰板 2026-08-21 12/600 2026-08-23 07:40 by ma0526
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +4 简单化xn 2026-08-22 8/400 2026-08-23 07:20 by ilovexiaobin
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 10/500 2026-08-23 07:17 by OEbVnUOu01ol
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 5/250 2026-08-23 04:07 by OEbVnUOu01ol
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 7/350 2026-08-23 03:55 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 6/300 2026-08-23 03:40 by OEbVnUOu01ol
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +3 zjuhero 2026-08-22 4/200 2026-08-22 20:02 by mycsru
[基金申请] 什么时候开奖? +7 CrisMessi 2026-08-18 8/400 2026-08-22 18:29 by 淀粉搬运工
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +13 ziyangfang 2026-08-19 16/800 2026-08-22 17:08 by WH3796
[教师之家] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 4/200 2026-08-22 16:52 by sunzitan
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +10 kulium 2026-08-21 13/650 2026-08-21 21:58 by alongwaytogo
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 让我中一个面上吧! +11 大萍1987 2026-08-20 13/650 2026-08-21 14:48 by 20120902066
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
信息提示
请填处理意见