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mengbiotech

金虫 (小有名气)

[求助] 关于透明圈法筛选淀粉酶

求教:

请问各位,用加有可溶性淀粉的LB平板筛选淀粉酶产生菌株,碘染后发现有透明圈。能确定菌株产的就是淀粉酶吗?有没有可能是别的酶也会作用产生透明圈,从而干扰试验?

如果是淀粉酶的话,一般是那种淀粉酶主要起作用呢?是α?β?还是其他的?

果胶酶也是,采用刚果红染色的,筛选出来有透明圈的,一定是果胶酶吗?会不会有其他可能的酶干扰?


请指导!谢谢!
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热爱生活,热爱生命
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lalafeng0401

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+5, good! 2013-04-11 17:21:54
1.一般情况下,认为有水解圈的就是含有淀粉酶的;
2. 细菌因该是不仅仅分泌一种淀粉酶的(待确定)。
3.如果需要确定是否是分泌淀粉酶的菌可以进行分子水平鉴定,如通过16S鉴定菌属,然后从数据库(NCBI, KEGG等)里了解其基因组信息,看是否含有淀粉酶基因,具体是哪种,就可以比较肯定的确定了。
3楼2013-04-11 15:01:56
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司徒伊雪儿

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我们老师今天提到   说是能的  具体原因还没讲到
2楼2013-04-10 15:26:18
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
现在除了用降解圈法之外还能用什么办法?
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
4楼2013-04-12 00:58:35
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戴晓凤

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果用淀粉做单一碳源,是不是比较有说服力?还有,至于具体是哪种淀粉酶,可能还要分离出这种酶作进一步的分析,或者直接用基因进行比对分析。
每天进步一点
5楼2013-04-12 10:35:16
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