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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 木聚糖酶的定性检测方法
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食欲不振

新虫 (初入文坛)

[求助] 木聚糖酶的定性检测方法

在做木聚糖酶高产菌株的筛选。由于筛选量大，还没有找到一种比较高效的筛选方法。求高人指点啊~~
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人生漫漫旅途···
1楼 2012-02-19 21:16:30
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biolio2009

木虫 (著名写手)
做平板，里边添加 木聚糖 做透明圈粗筛
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2楼2012-02-20 09:07:43
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biolio2009

木虫 (著名写手)
西北大学化工学院  2010年有一篇《木聚糖酶的生产与应用研究》学位论文，里边测定木聚糖酶活力的方法很具体。去参考下吧
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3楼2012-02-20 09:11:15
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食欲不振

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
楼: Originally posted by biolio2009 at 2012-02-20 09:07:43:
做平板，里边添加 木聚糖 做透明圈粗筛

嗯，目前是在用这个方法，但是筛选量太大了，想能找一种方法能大批量操作~~看其他一些做筛选的人，有用96孔板的~~那样效率好高呀~~
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人生漫漫旅途···
4楼2012-02-20 11:13:25
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biolio2009

木虫 (著名写手)
告诉你吧  那都是用来发文章的   你难道不认为吗  
要想获得一个好菌种 ，那是的实干出来的，记住了
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5楼2012-02-20 14:26:24
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jingsi1788

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
量取0.75 mL用0.1 mol/L醋酸缓冲液(pH 4.6)配制的0.5%木聚糖溶液，0.25mL粗酶液，50°C水浴保温30 min后，取出立即加入0.75 mL DNS 试剂，煮沸10 min后取出冷却，用去离子水稀释至10 mL，于520 nm处测定吸光值。定义1 min内催化产生1 mg木糖所需要的酶量为1 个酶活单位(U)，设3 个平行，求平均值。
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好好学习，天天向上~
6楼2012-02-27 21:14:14
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署之林

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by jingsi1788 at 2012-02-27 21:14:14
量取0.75 mL用0.1 mol/L醋酸缓冲液(pH 4.6)配制的0.5%木聚糖溶液，0.25mL粗酶液，50°C水浴保温30 min后，取出立即加入0.75 mL DNS 试剂，煮沸10 min后取出冷却，用去离子水稀释至10 mL，于520 nm处测定吸光值。定义 ...

朋友，我想说的是我配木聚糖溶液的时候是用pH4.8的溶液，但是就是不溶解？不知道为啥啊？你是怎么处理的才溶解的啊？
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7楼2012-09-22 22:44:41
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hgp101

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 署之林 at 2012-09-22 22:44:41
朋友，我想说的是我配木聚糖溶液的时候是用pH4.8的溶液，但是就是不溶解？不知道为啥啊？你是怎么处理的才溶解的啊？...

加热就能溶解了。
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从事生态环境监测工作
8楼2012-09-24 10:02:22
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

有很多多糖都是在室温下不溶解的，要加热帮助溶解。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
9楼2012-09-24 16:12:41
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署之林

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by hgp101 at 2012-09-24 10:02:22
加热就能溶解了。...

我是沸水浴加热了，就不是溶解，难道是木聚糖的问题啊？
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10楼2012-09-26 09:35:28
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