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索尼娅012

新虫 (初入文坛)

[求助] 血浆处理及数据分析

药物易溶于甲醇、二氯甲烷、乙酸乙酯，可溶于乙腈、乙醚。有几下几个问题：
①液-液萃取进行血浆处理，用二氯甲烷做提取试剂，血浆浮到液面以上，如何取上清液。
②采用乙酸乙酯、乙醚做提取试剂，质谱为MRM模式，样本处有很大干扰；甲醇或乙腈沉淀蛋白，干扰变小。蛋白沉淀比液-液萃取干净，为什么干扰会变小，此外，干扰始终存在，该怎么办？
③肠溶制剂在研究体内外相关性时，体外溶出参照药典，酸中2h不释放，pH6.8缓冲液中5h分别采点计算累计释放度。体内吸收数据该如何选取，需要和体外采点时间一致吗？beagle犬的胃排空时间只有45min左右？
希望能得到各位老师的指点，谢谢！
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1楼 2013-04-08 10:24:00
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药分加油

木虫 (著名写手)
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2楼2013-04-09 19:46:32
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索尼娅012

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 药分加油 at 2013-04-09 19:46:32
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3楼2013-04-10 08:48:04
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张慧霞桔梗

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
索尼娅012: 金币+3, ★有帮助, 谢谢您的指点 2013-04-10 15:23:45
1，二氯甲烷密度大，用二氯甲烷提取后上清液在下层，直接将枪头伸到液面下方，将其取出即可。
2，蛋白沉淀比液液萃取干净，可能也与你所用的沉淀剂的量有关吧，就相当于把基质稀释了，这样空白干扰的峰面积会变小，同时你的药物响应也会变小。到底应该选用哪个方法，是根据你的空白干扰是否在LLOQ面积20%来决定的。还有，如果单一的溶剂干扰大的话，你也可以用混合的，比如乙酸乙酯和二氯甲烷，或和乙醚等混合。
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4楼2013-04-10 09:51:26
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索尼娅012

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 张慧霞桔梗 at 2013-04-10 09:51:26
1，二氯甲烷密度大，用二氯甲烷提取后上清液在下层，直接将枪头伸到液面下方，将其取出即可。
2，蛋白沉淀比液液萃取干净，可能也与你所用的沉淀剂的量有关吧，就相当于把基质稀释了，这样空白干扰的峰面积会变小， ...

枪头伸到液面下方取液体，样品会被污染吗？
乙腈蛋白沉淀，并N2吹干复溶，与用二氯甲烷液-液萃取后的样品，响应差不多，选择哪种方法较好？主要的疑惑是：乙腈N2吹耗时长，二氯甲烷吹干耗时短，但样品易乳化（摸索条件时用二氯甲烷萃取均未乳化，但听很多人说用二氯甲烷萃取为下下策）
由于是初次做血浆样本，有很多不解之处望谅解！
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5楼2013-04-10 15:22:45
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张慧霞桔梗

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
索尼娅012: 金币+1 2013-04-12 16:05:04
之前我们有用过二氯甲烷提取，都是这么取的，小心些，应该是不会污染的。因为取样的不容易，所以一般是不单独用它的。
你做两种方法的回收率和基质效应了吗？现在二者响应差不多，那沉淀蛋白的基质效应应该是不合格的吧？
你试试混合溶剂啊
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6楼2013-04-12 13:34:37
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索尼娅012

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 张慧霞桔梗 at 2013-04-12 13:34:37
之前我们有用过二氯甲烷提取，都是这么取的，小心些，应该是不会污染的。因为取样的不容易，所以一般是不单独用它的。
你做两种方法的回收率和基质效应了吗？现在二者响应差不多，那沉淀蛋白的基质效应应该是不合格 ...

为什么沉淀蛋白基质效应不合格呢？
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7楼2013-04-12 16:06:56
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