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索尼娅012

新虫 (初入文坛)

[求助] 血浆处理及数据分析

药物易溶于甲醇、二氯甲烷、乙酸乙酯,可溶于乙腈、乙醚。有几下几个问题:
①液-液萃取进行血浆处理,用二氯甲烷做提取试剂,血浆浮到液面以上,如何取上清液。
②采用乙酸乙酯、乙醚做提取试剂,质谱为MRM模式,样本处有很大干扰;甲醇或乙腈沉淀蛋白,干扰变小。蛋白沉淀比液-液萃取干净,为什么干扰会变小,此外,干扰始终存在,该怎么办?
③肠溶制剂在研究体内外相关性时,体外溶出参照药典,酸中2h不释放,pH6.8缓冲液中5h分别采点计算累计释放度。体内吸收数据该如何选取,需要和体外采点时间一致吗?beagle犬的胃排空时间只有45min左右?
希望能得到各位老师的指点,谢谢!
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药分加油

木虫 (著名写手)

楼主有答案了吗?分享一下吧
2楼2013-04-09 19:46:32
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索尼娅012

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 药分加油 at 2013-04-09 19:46:32
楼主有答案了吗?分享一下吧

3楼2013-04-10 08:48:04
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张慧霞桔梗

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
索尼娅012: 金币+3, 有帮助, 谢谢您的指点 2013-04-10 15:23:45
1,二氯甲烷密度大,用二氯甲烷提取后上清液在下层,直接将枪头伸到液面下方,将其取出即可。
2,蛋白沉淀比液液萃取干净,可能也与你所用的沉淀剂的量有关吧,就相当于把基质稀释了,这样空白干扰的峰面积会变小,同时你的药物响应也会变小。到底应该选用哪个方法,是根据你的空白干扰是否在LLOQ面积20%来决定的。还有,如果单一的溶剂干扰大的话,你也可以用混合的,比如乙酸乙酯和二氯甲烷,或和乙醚等混合。
4楼2013-04-10 09:51:26
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索尼娅012

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 张慧霞桔梗 at 2013-04-10 09:51:26
1,二氯甲烷密度大,用二氯甲烷提取后上清液在下层,直接将枪头伸到液面下方,将其取出即可。
2,蛋白沉淀比液液萃取干净,可能也与你所用的沉淀剂的量有关吧,就相当于把基质稀释了,这样空白干扰的峰面积会变小, ...

枪头伸到液面下方取液体,样品会被污染吗?
乙腈蛋白沉淀,并N2吹干复溶,与用二氯甲烷液-液萃取后的样品,响应差不多,选择哪种方法较好?主要的疑惑是:乙腈N2吹耗时长,二氯甲烷吹干耗时短,但样品易乳化(摸索条件时用二氯甲烷萃取均未乳化,但听很多人说用二氯甲烷萃取为下下策)
由于是初次做血浆样本,有很多不解之处望谅解!
5楼2013-04-10 15:22:45
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张慧霞桔梗

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


索尼娅012: 金币+1 2013-04-12 16:05:04
之前我们有用过二氯甲烷提取,都是这么取的,小心些,应该是不会污染的。因为取样的不容易,所以一般是不单独用它的。
你做两种方法的回收率和基质效应了吗?现在二者响应差不多,那沉淀蛋白的基质效应应该是不合格的吧?
你试试混合溶剂啊
6楼2013-04-12 13:34:37
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索尼娅012

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 张慧霞桔梗 at 2013-04-12 13:34:37
之前我们有用过二氯甲烷提取,都是这么取的,小心些,应该是不会污染的。因为取样的不容易,所以一般是不单独用它的。
你做两种方法的回收率和基质效应了吗?现在二者响应差不多,那沉淀蛋白的基质效应应该是不合格 ...

为什么沉淀蛋白基质效应不合格呢?
7楼2013-04-12 16:06:56
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