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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 原代成纤维细胞培养，各位给看看哪里出了什么问题。
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sofanxmc

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1楼2013-04-07 09:31:19
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bunny0512

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+2, BioEPI+1, 鼓励积极发帖帮助解答问题。 2013-04-07 20:19:03
1.图一的细胞形态看着还可以，我养的原代成纤维是小鼠胚胎成纤维细胞，取13.5d的胎鼠去头尾内脏四肢，剪碎，0.05%TE消化10min，铺到一个100mm dish里，2-3天长满传代1:3传。  因为用的是胎鼠，所以不存在毛发的问题，但是母鼠要尽可能的消毒，每个步骤都用PBS洗涤，一个步骤一个盘，避免污染毛发中的病菌。注意胰酶消化时间不要太长，原代处理十分钟，传代处理2.5min-3min。
2.图二的细胞看起来不太像成纤维。。有可能是天数太多，细胞存活太少， 不知道你为什么一定要用肺做这个。。我也没见过用肺做的，这个细胞不是在皮肤里比较多么。。。
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在哪里~在哪里见过你~
2楼2013-04-07 11:22:23
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sofanxmc

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3楼2013-04-07 11:39:39
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672082

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引用回帖:
3楼: Originally posted by sofanxmc at 2013-04-07 11:39:39
图一的试验做过两次，两次之间小鼠周龄几乎翻倍，感觉翻倍后的材料易污染，应该是毛发没处理干净，故有此疑问。或许真可以试下胎鼠。

图二用酶消化法，离心得到成纤维细胞，随后将组织残渣顺便接种，所以用肺做 ...

楼主，我现在也做纤维细胞的培养，使用的是C57-BALCK6，我实验室只有0.05%tryspin, 和dispase，trypLE,三种胰酶，请问取下小鼠皮肤后要如何处理呢？
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4楼2017-12-19 10:47:01
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