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安静的瀑布

银虫 (小有名气)

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[交流] 【求助/交流】求助3T3成纤维细胞的培养方案已有4人参与

做了一个细胞支架材料，要看看能不能养活细胞，但我从没养过，不知道怎么下手，希望各位好心的虫友能指点一下，给个方案！谢谢了

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1楼 2010-07-05 20:46:35

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senoy

木虫 (正式写手)

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dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-07-06 09:18:24
安静的瀑布(金币+7): 2010-07-07 18:28:53

我没试过用支架材料养细胞，只用普通的细胞平皿养。先给你做个参考吧。
3T3细胞下到10mm2 培养皿，8ml MEM完全培养基(10%新生牛血清)培养到90%密度(一般三天)，用1.5ml(0.125%胰酶、0.02%EDTA in pbs)37度消化5~7min，然后用6ml MEM完全培养基(10%新生牛血清)吹打成单细胞溶液，按1:3传代，补培养液到8ml. 一般2天后又可继续传代了。