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安静的瀑布

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】求助3T3成纤维细胞的培养方案 已有4人参与

做了一个细胞支架材料,要看看能不能养活细胞,但我从没养过,不知道怎么下手,希望各位好心的虫友能指点一下,给个方案!谢谢了
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senoy

木虫 (正式写手)


dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-07-06 09:18:24
安静的瀑布(金币+7): 2010-07-07 18:28:53
我没试过用支架材料养细胞,只用普通的细胞平皿养。先给你做个参考吧。
3T3细胞下到10mm2 培养皿,8ml MEM完全培养基(10%新生牛血清)培养到90%密度(一般三天),用1.5ml(0.125%胰酶、0.02%EDTA in pbs)37度消化5~7min,然后用6ml MEM完全培养基(10%新生牛血清)吹打成单细胞溶液,按1:3传代,补培养液到8ml. 一般2天后又可继续传代了。
2楼2010-07-06 09:16:57
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liyangmiscap

木虫 (著名写手)


dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-07-07 08:19:39
安静的瀑布(金币+1): 2010-07-07 18:29:06
也可以用普通的培养瓶,玻璃的或是塑料的都是可以的。培养基可以使用1640(10%NCS),传代时用0.25%的胰酶消化1~2min即可
愿与你携手,沿河看柳
3楼2010-07-06 14:59:10
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xuech117

新虫 (初入文坛)

3t3有几种,基本都还是比较好养的。
4楼2010-07-07 07:34:18
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龙头

金虫 (正式写手)

养的MC3T3,挺好养的,加油
5楼2010-07-09 17:32:00
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