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wunavy木虫 (初入文坛)
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原代培养中的困惑
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最近在做小鼠结肠成纤维细胞的原代培养,将组织(5-10cm)剪碎(1立方毫米左右)后,加0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA(1:1,4ml)于二氧化碳培养箱中消化(6次,每次10min),第一次10min组织就呈胶冻状,2-5次消化过程中这种胶冻状物一直存在,难以吸取上清,离心后细胞数目也不多。 请问怎么避免产生这种胶冻状物质?是不是胰酶量太少了?消化过程要不要搅拌?胰酶浓度?消化时间? 望指教!谢谢!! |
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wendywan
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