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wunavy木虫 (初入文坛)
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原代培养中的困惑
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最近在做小鼠结肠成纤维细胞的原代培养，将组织（5-10cm）剪碎（1立方毫米左右）后，加0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA（1：1，4ml）于二氧化碳培养箱中消化（6次，每次10min），第一次10min组织就呈胶冻状，2-5次消化过程中这种胶冻状物一直存在，难以吸取上清，离心后细胞数目也不多。 请问怎么避免产生这种胶冻状物质？是不是胰酶量太少了？消化过程要不要搅拌？胰酶浓度？消化时间？ 望指教！谢谢！！ |
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wendywan
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