24小时热门版块排行榜    

查看: 2130  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

wunavy

木虫 (初入文坛)

[求助] 原代培养中的困惑

最近在做小鼠结肠成纤维细胞的原代培养,将组织(5-10cm)剪碎(1立方毫米左右)后,加0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA(1:1,4ml)于二氧化碳培养箱中消化(6次,每次10min),第一次10min组织就呈胶冻状,2-5次消化过程中这种胶冻状物一直存在,难以吸取上清,离心后细胞数目也不多。
请问怎么避免产生这种胶冻状物质?是不是胰酶量太少了?消化过程要不要搅拌?胰酶浓度?消化时间?
望指教!谢谢!!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liwenmin

金虫 (小有名气)

做过,但是次数不多。
5楼2011-09-15 08:42:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

wendywan

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
wunavy(金币+10): 谢谢 2011-09-13 21:37:28
adslye(金币+5): 鼓励新虫交流~鼓励好的建议! 2011-09-14 15:59:02
胰酶加多点,消化时间控制在15min之内,另外可以加一点DNA酶!
每天都应该做点有意义的事情!
2楼2011-09-13 16:52:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liwenmin

金虫 (小有名气)

★ ★
adslye(金币+2): 感谢交流~祝顺利! 2011-09-14 15:59:20
我做元代培养的时候选择的胰酶浓度是0.125%,消化的时间比较长,在20min左右,我通常情况下不搅拌,直接放在培养箱中就可以了。
出现你这种情况通常是消化时间过短。但是我没你消化那么多次。
仅供参考。
3楼2011-09-14 14:42:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wl03

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by liwenmin at 2011-09-14 14:42:10:
我做元代培养的时候选择的胰酶浓度是0.125%,消化的时间比较长,在20min左右,我通常情况下不搅拌,直接放在培养箱中就可以了。
出现你这种情况通常是消化时间过短。但是我没你消化那么多次。
仅供参考。

你好,请问你有做过肝脏原代细胞培养吗?
。。。
4楼2011-09-14 16:57:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +13 Kittylucky 2026-08-27 14/700 2026-09-01 11:06 by feng6531
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候,我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +8 ziyangfang 2026-08-25 11/550 2026-09-01 09:51 by zzuzxg
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +7 gdd2018 2026-08-28 12/600 2026-09-01 08:32 by 尼古拉斯小虫
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +6 叶九微 2026-08-26 6/300 2026-08-31 23:54 by yudaoqian88
[基金申请] 国社科又开始会评了,不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 能否申诉? +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗? +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 为什么到现在没收到通知? +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件,有关系吗? +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 今天务委会开完了,明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
信息提示
请填处理意见