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sofanxmc

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sofanxmc

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3楼2013-04-07 11:39:39
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bunny0512

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+2, BioEPI+1, 鼓励积极发帖帮助解答问题。 2013-04-07 20:19:03
1.图一的细胞形态看着还可以,我养的原代成纤维是小鼠胚胎成纤维细胞,取13.5d的胎鼠去头尾内脏四肢,剪碎,0.05%TE消化10min,铺到一个100mm dish里,2-3天长满传代1:3传。  因为用的是胎鼠,所以不存在毛发的问题,但是母鼠要尽可能的消毒,每个步骤都用PBS洗涤,一个步骤一个盘,避免污染毛发中的病菌。注意胰酶消化时间不要太长,原代处理十分钟,传代处理2.5min-3min。
2.图二的细胞看起来不太像成纤维。。有可能是天数太多,细胞存活太少, 不知道你为什么一定要用肺做这个。。我也没见过用肺做的,这个细胞不是在皮肤里比较多么。。。
在哪里~在哪里见过你~
2楼2013-04-07 11:22:23
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672082

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引用回帖:
3楼: Originally posted by sofanxmc at 2013-04-07 11:39:39
图一的试验做过两次,两次之间小鼠周龄几乎翻倍,感觉翻倍后的材料易污染,应该是毛发没处理干净,故有此疑问。或许真可以试下胎鼠。

图二用酶消化法,离心得到成纤维细胞,随后将组织残渣顺便接种,所以用肺做 ...

楼主,我现在也做纤维细胞的培养,使用的是C57-BALCK6,我实验室只有0.05%tryspin, 和dispase,trypLE,三种胰酶,请问取下小鼠皮肤后要如何处理呢?
4楼2017-12-19 10:47:01
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