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我用PI来染MCF-7敏感细胞,整个过程流程如下:弃去培养液,用冷PBS洗2次,用4%多聚甲醛固定半个小时,弃去固定液,用冷PBS洗2次,加入1ml的染色工作液(按照要求稀释10倍),再加入5微升的PI染料,避光保存5min,弃去染液,用PBS洗两次后,至于荧光显微镜下观察,用绿光激发,发现整个细胞都呈现红色!考虑到我的药物的原因(入核),我这次分别试了不加药和加药的,PI也买了新的,但是结果做出来依旧是整个细胞都显红色!非常疑惑,求高手解惑!!
补:所有操作都是在24孔板中进行。 |
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