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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】DNA Ladder 这么难做吗？
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冷月5565

木虫 (职业作家)

[交流] 【求助/交流】DNA Ladder 这么难做吗？ 已有1人参与

我师兄曾做过，电泳跑出来是拖成一片。我参考网上的意见把琼脂糖浓度加到百分之二，电压调到40V（胶长约20cm）。还是拖成一片。幸好这只是预实验。
查了咱论坛上以前的帖子，不少网友说成功率很低。莫非我该放弃这种检测方法？或者先用某种强凋亡诱导物试一试？
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1楼 2010-09-23 19:40:02
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-09-24 06:04:18
冷月5565(金币+3): 2010-09-24 08:54:41
冷月5565(金币+1): 2010-09-30 11:07:06
是的，时间点要把握得很好才行
其实凋亡有其他很多种检测手段的啦
比如最经典的Hoechst染色，还有Caspase活性检测，以及Annexin V/PI双染等
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2楼2010-09-23 20:54:18
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冷月5565

木虫 (职业作家)
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-09-23 20:54:18:
是的，时间点要把握得很好才行
其实凋亡有其他很多种检测手段的啦
比如最经典的Hoechst染色，还有Caspase活性检测，以及Annexin V/PI双染等

和电泳液的种类有关系吗？我用的是TAE。
试验计划中也打算做Caspase、Annexin 等等，不过做的检测项目太少了似乎不太好。
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3楼2010-09-24 10:22:52
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
冷月5565(金币+1): 2010-09-24 10:39:30
引用回帖:
Originally posted by 冷月5565 at 2010-09-24 10:22:52:

和电泳液的种类有关系吗？我用的是TAE。
试验计划中也打算做Caspase、Annexin 等等，不过做的检测项目太少了似乎不太好。

凋亡是一个形态学概念，因此Hoechst、电镜是金指标，当然金指标还得包括一个Ladder
我想，只要你Hoechst这种最不敏感的方法都能测出来，那么就差不离了
你可以用1000种方法去证明你的模型是凋亡，但实际上并不需要在检测层面上低水平重复，好的文章是深度
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4楼2010-09-24 10:25:34
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heartear1

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-09-24 10:25:34:
凋亡是一个形态学概念，因此Hoechst、电镜是金指标，当然金指标还得包括一个Ladder
我想，只要你Hoechst这种最不敏感的方法都能测出来，那么就差不离了
你可以用1000种方法去证明你的模型是凋亡，但实际上并 ...

啊！ ATP说得在理！！ 学习了！！！
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资源昆虫
5楼2011-03-10 09:28:05
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