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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 粮油与蛋白 » 凝胶过滤色谱与高效液相色谱的区别，这两个色谱在分离纯化多肽时有何优缺点？
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malele0208

金虫 (小有名气)

[求助] 凝胶过滤色谱与高效液相色谱的区别，这两个色谱在分离纯化多肽时有何优缺点？

凝胶过滤色谱与高效液相色谱的区别
这两个色谱在分离纯化多肽时有何优缺点？
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1楼 2013-04-01 21:18:23
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

dandan_cece

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
凝胶过滤是通过分子量大小来进行分离的，跟HPLC用的柱子不一样，好像应该先过凝胶柱然后再上液相吧，我也是新手，最近也在分离纯化多肽，可以一起讨论哇
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2楼2013-04-02 09:10:50
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huhyyong

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

设备运作原理差不多，柱子和填料不填，液相相对精度压力之类的大些，分离方式也都分好多种，分子筛、离子交换、极性大小
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16楼2013-11-09 14:27:57
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malele0208

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by dandan_cece at 2013-04-02 09:10:50
凝胶过滤是通过分子量大小来进行分离的，跟HPLC用的柱子不一样，好像应该先过凝胶柱然后再上液相吧，我也是新手，最近也在分离纯化多肽，可以一起讨论哇

如果凝胶是通过分子量进行分离，那超滤可以代替凝胶了吧，我超滤后直接进行液相也行了呗，是这个意思吗？
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3楼2013-04-06 09:41:40
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dandan_cece

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

树树8013: 应助指数+1, 欢迎继续关注食品板块 2013-04-15 21:49:18
引用回帖:
3楼: Originally posted by malele0208 at 2013-04-06 09:41:40
如果凝胶是通过分子量进行分离，那超滤可以代替凝胶了吧，我超滤后直接进行液相也行了呗，是这个意思吗？...

凝胶比超滤分的更细吧，超滤是初分，我也用超滤分了，然后上离子交换柱，不过目前离子交换柱分的效果不太理想，还在摸索阶段，如果超滤后直接进行液相，可能杂质会比较多吧，我也不是很懂啦
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4楼2013-04-07 12:46:27
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malele0208

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by dandan_cece at 2013-04-07 12:46:27
凝胶比超滤分的更细吧，超滤是初分，我也用超滤分了，然后上离子交换柱，不过目前离子交换柱分的效果不太理想，还在摸索阶段，如果超滤后直接进行液相，可能杂质会比较多吧，我也不是很懂啦...

你的离子交换柱是什么样的？用什么填料啊？
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5楼2013-04-08 10:50:08
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dandan_cece

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by malele0208 at 2013-04-08 10:50:08
你的离子交换柱是什么样的？用什么填料啊？...

我的柱子比较大诶，是4*40cm的，填料用的是SP Sephadex C-25
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6楼2013-04-16 09:20:57
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malele0208

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by dandan_cece at 2013-04-16 09:20:57
我的柱子比较大诶，是4*40cm的，填料用的是SP Sephadex C-25...

凝胶过滤色谱需要特殊的设备吗？怎么控制流速啊？
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7楼2013-04-18 08:26:08
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dandan_cece

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by malele0208 at 2013-04-18 08:26:08
凝胶过滤色谱需要特殊的设备吗？怎么控制流速啊？...

这个我没做过诶，我也不清楚，控制流速我用过恒流泵，如果做液相什么的，流速在电脑上设置一下就行了
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8楼2013-04-19 10:06:22
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malele0208

金虫 (小有名气)
★ ★
zybpxy: 金币+2, 热情回帖,赞一个 2013-05-16 20:08:54
引用回帖:
8楼: Originally posted by dandan_cece at 2013-04-19 10:06:22
这个我没做过诶，我也不清楚，控制流速我用过恒流泵，如果做液相什么的，流速在电脑上设置一下就行了...

我就在想这个凝胶过滤怎么做呢，最近要做，也没有人指导我，不用恒流泵的话，简单调一下流速，用标样先走一次，每隔几分钟一收集，用紫外检测器检测，绘制曲线，找到峰值，记住出峰时间，再进行上样，再相应出峰时间进行收集，是这样的吗？
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9楼2013-04-20 09:07:42
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dandan_cece

铜虫 (正式写手)
★ ★
树树8013: 金币+2, 谢谢参与应助，食品板块欢迎你 2013-04-21 20:25:45
引用回帖:
9楼: Originally posted by malele0208 at 2013-04-20 09:07:42
我就在想这个凝胶过滤怎么做呢，最近要做，也没有人指导我，不用恒流泵的话，简单调一下流速，用标样先走一次，每隔几分钟一收集，用紫外检测器检测，绘制曲线，找到峰值，记住出峰时间，再进行上样，再相应出峰时 ...

嗯，应该是这样，但是不用恒流泵怎么控制流速？
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10楼2013-04-20 14:34:45
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