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基因重组突变
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jiaojiao2479
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基因重组突变
求助,我是一个新手
想把细菌的一段特定基因通过基因重组突变掉,而且要好筛选,怎么做啊???谢谢高人指点
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1楼
2013-03-25 10:40:16
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tianchi2952
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7楼
:
Originally posted by
jiaojiao2479
at 2013-03-29 22:36:31
就会想做基因敲除,我查了点文献,关于引物设计和载体构建什么的不太明白,有什么好的指点吗?...
我现在想知道的是你是想达到一个什么目的,是要让这个基因变异掉还是让其沉默不表达或者是构建新的表达基因,目的不同方法也不同,没必要去花大力气去做基因敲除,基因敲除需要一整套载体系统,没有载体系统是不能做的,不光是设计几条引物那么简单的,定点改变原始基因组中某个基因很复杂......
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8楼
2013-03-30 08:57:56
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tianchi2952
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【答案】应助回帖
★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhangxingc: 金币+2, 鼓励新虫积极发帖交流,欢迎常到微生物版
2013-03-26 08:47:07
基因敲除不就突变了吗......
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2楼
2013-03-25 12:53:32
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jiaojiao2479
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2楼
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Originally posted by
tianchi2952
at 2013-03-25 12:53:32
基因敲除不就突变了吗......
嗯嗯,就是这个,但是什么引物,突变片段,还有用到的酶等 一些具体的步骤和原理,谢谢知道
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3楼
2013-03-25 15:12:37
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tianchi2952
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【答案】应助回帖
这个不是一般实验室能做的,基因敲除一般用于靶向定点变异,成本较高.....慎重考虑......程序有点复杂,如果只是想破坏这个基因不让其表达的话还有其他的办法,紫外诱变筛选也可以,成本较低,便于操作,只是有时候要靠运气,诱变育种不是每次都能成功的.......祝你好运!
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4楼
2013-03-26 13:24:49
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