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数峰青1989

铁虫 (小有名气)

[求助] 5'race 没有结果,求高人指点

近一段时间在用takara的试剂盒做5'race,但是第二次PCR之后怎么也得不到一个清晰的条带。。。实验结果如所附图,请高人指点一二

RNA分离结果(该结果说明rna提取很成功,可以做下一步实验).jpg



2次PCR之后产物电泳结果(没有条带,原因是什么,请高人指点).jpg
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platanus

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
数峰青1989(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-05-31 16:16:18
你提取的RNA质量很好,不知道你反转录之后有没有检测过反转录的质量,还有5‘RACE比较难做,跟引物、退火温度等等原因都有关系,多做一些尝试吧!
5楼2013-03-29 17:32:11
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platanus

木虫 (著名写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 数峰青1989 at 2013-03-29 21:06:12
谢谢啦。。。提取完RNA之后,我就照着takara试剂盒上的步骤一步一步的做,真不知道怎么回事。。。
反转录之后怎么检测反转录的质量啊。。。这个真没有做,也不知道...

反转录之后要用看家基因检测一下反转录的质量的,因为也有可能问题出现在反转录过程的!
7楼2013-03-29 22:13:07
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