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HPLC纯度分析
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各位老虫，我最近在做一抗体片段的纯度分析（一类新药，没有标准品），参照药典三部上一般运用电泳和分子排阻HPLC法进行分析，电泳法没什么问题，就是在运用液相分析时不是太清楚相关情况，忘有了解的虫友发表下自己的意见，谢谢了！ 1. 我们的样品里面有单体、二倍体和多倍体同时存在，实验的目的是要得出单体和二倍体的含量 2.我用常规的缓冲盐溶液进行分析时，根本得不出结果，峰形非常差；而将样品用6M盐酸胍处理后，便能得到理想的峰图和纯度结果 而药典上其他类型的单抗或者重组药物在用分子排阻HPLC法分析纯度时，一般的PBS缓冲液或者PBS含有1%异丙醇即可，。请问将样品用盐酸胍处理后进行HPLC纯度分析的方法是否可行，在进行新药申报时会不会遇到麻烦啊？因为6M盐酸胍时蛋白已经变性了；另外，缓冲盐中加入1%异丙醇的作用是什么，是否会使蛋白变性？ |
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