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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 实验室分析、仪器 » DPPH抗氧化测定，液体样品
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zhcm2011

银虫 (初入文坛)

[求助] DPPH抗氧化测定，液体样品

如题，目前在设计试验方案，所提取物质为液体，打算做一下它的活性。却又很纠结液体样品怎么做呢。
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1楼 2013-03-16 08:57:36
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

sally杨美

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zhcm2011: 金币+3, ★有帮助 2013-03-17 11:21:54
将样品稀释成不同浓度梯度，加入DPPH，（0.4ml样，2mlDPPH），黑暗处反应半小时后测OD517，不同浓度梯度Vc也做一份，DPPH的清除曲线，做出曲线后清除能力用50%清除率时 浓度表示DP50
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3楼2013-03-16 21:06:56
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蓝色de风雪

至尊木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zhcm2011: 金币+4, ★★★很有帮助 2013-03-18 09:25:16
引用回帖:
4楼: Originally posted by zhcm2011 at 2013-03-16 23:07:26
如果样品是液体呢，我就是很愁那个样品是液体的，不比固体样品呀...

将一容量瓶放天平上，滴入你设计好的重量的样品，然后定容，以mg/mL计
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5楼2013-03-18 00:18:47
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lvmeng1919

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
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树树8013: 金币+2, 欢迎新虫友的到来，欢迎常来 2013-03-19 20:37:34
【试剂配制】
DPPH 0.004g到100mL乙醇中（0.1mmol/L）（DPPH为1,1-二苯基-2-苦基肼）
【测定】
0.2ml样品（若浓度过高可进行稀释）加入到2.8mLDPPD试剂中，避光反应30min，在517nm波长下测定吸光度值。
【计算】
DPPH抑制率（%）= （ 为空白， 为样品）
若样品本身有吸光值，则要消除样品自身的干扰，将0.2mL样品加入到2.8mL乙醇中测定其吸光值（ ），则公式为：DPPH抑制率（%）=
（IC50值为样品提取液抑制DPPH的吸光度50%时提取物的浓度）
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天道酬勤
6楼2013-03-18 09:08:43
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sunnymen

银虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by manitoniu at 2013-03-28 22:30:38
请问DPPH的浓度要选择多少呢？？？...

0.2mmol/L，我用的是这个浓度，有些论文里面写的是60μmol/L，那个测出来吸光度太低
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8楼2013-03-29 10:55:03
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manitoniu

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by sunnymen at 2013-03-29 10:55:03
0.2mmol/L，我用的是这个浓度，有些论文里面写的是60μmol/L，那个测出来吸光度太低...

你做的样品和DPPH各多少ml？楼上说0.2ml样+2.8DPPH，还有文献用1ml样+4mlDPPH。好多种，怎么选择呢~~~还有DPPH贵吗
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10楼2013-03-30 11:26:07
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普通回帖

sunnymen

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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zhcm2011: 金币+3, ★有帮助 2013-03-17 11:21:34
液体样品很好做啊。你配制成不同浓度样品，在加入DPPH，反应半小时后测OD517，让后做一下Vc对DPPH的清除曲线作为对照用。
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2楼2013-03-16 15:19:59
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zhcm2011

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by sally杨美 at 2013-03-16 21:06:56
将样品稀释成不同浓度梯度，加入DPPH，（0.4ml样，2mlDPPH），黑暗处反应半小时后测OD517，不同浓度梯度Vc也做一份，DPPH的清除曲线，做出曲线后清除能力用50%清除率时 浓度表示DP50

如果样品是液体呢，我就是很愁那个样品是液体的，不比固体样品呀
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4楼2013-03-16 23:07:26
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manitoniu

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by sunnymen at 2013-03-16 15:19:59
液体样品很好做啊。你配制成不同浓度样品，在加入DPPH，反应半小时后测OD517，让后做一下Vc对DPPH的清除曲线作为对照用。

请问DPPH的浓度要选择多少呢？？？
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7楼2013-03-28 22:30:38
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zhcm2011

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by manitoniu at 2013-03-28 22:30:38
请问DPPH的浓度要选择多少呢？？？...

我一直用的，0.025mg/mL
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9楼2013-03-29 12:01:47
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