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zhcm2011

银虫 (初入文坛)

[求助] DPPH抗氧化测定,液体样品

如题,目前在设计试验方案,所提取物质为液体,打算做一下它的活性。却又很纠结液体样品怎么做呢。
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sally杨美

铜虫 (初入文坛)

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zhcm2011: 金币+3, 有帮助 2013-03-17 11:21:54
将样品稀释成不同浓度梯度,加入DPPH,(0.4ml样,2mlDPPH),黑暗处反应半小时后测OD517,不同浓度梯度Vc也做一份,DPPH的清除曲线,做出曲线后清除能力用50%清除率时 浓度表示DP50
3楼2013-03-16 21:06:56
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蓝色de风雪

至尊木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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zhcm2011: 金币+4, ★★★很有帮助 2013-03-18 09:25:16
引用回帖:
4楼: Originally posted by zhcm2011 at 2013-03-16 23:07:26
如果样品是液体呢,我就是很愁那个样品是液体的,不比固体样品呀...

将一容量瓶放天平上,滴入你设计好的重量的样品,然后定容,以mg/mL计
5楼2013-03-18 00:18:47
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lvmeng1919

铁虫 (初入文坛)

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树树8013: 金币+2, 欢迎新虫友的到来,欢迎常来 2013-03-19 20:37:34
【试剂配制】
DPPH 0.004g到100mL乙醇中(0.1mmol/L)(DPPH为1,1-二苯基-2-苦基肼)
【测定】
0.2ml样品(若浓度过高可进行稀释)加入到2.8mLDPPD试剂中,避光反应30min,在517nm波长下测定吸光度值。
【计算】
DPPH抑制率(%)= ( 为空白, 为样品)
若样品本身有吸光值,则要消除样品自身的干扰,将0.2mL样品加入到2.8mL乙醇中测定其吸光值( ),则公式为:DPPH抑制率(%)=
(IC50值为样品提取液抑制DPPH的吸光度50%时提取物的浓度)
天道酬勤
6楼2013-03-18 09:08:43
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sunnymen

银虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by manitoniu at 2013-03-28 22:30:38
请问DPPH的浓度要选择多少呢???...

0.2mmol/L,我用的是这个浓度,有些论文里面写的是60μmol/L,那个测出来吸光度太低
8楼2013-03-29 10:55:03
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manitoniu

新虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by sunnymen at 2013-03-29 10:55:03
0.2mmol/L,我用的是这个浓度,有些论文里面写的是60μmol/L,那个测出来吸光度太低...

你做的样品和DPPH各多少ml?楼上说0.2ml样+2.8DPPH,还有文献用1ml样+4mlDPPH。好多种,怎么选择呢~~~还有DPPH贵吗
10楼2013-03-30 11:26:07
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普通回帖

sunnymen

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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zhcm2011: 金币+3, 有帮助 2013-03-17 11:21:34
液体样品很好做啊。你配制成不同浓度样品,在加入DPPH,反应半小时后测OD517,让后做一下Vc对DPPH的清除曲线作为对照用。
2楼2013-03-16 15:19:59
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zhcm2011

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by sally杨美 at 2013-03-16 21:06:56
将样品稀释成不同浓度梯度,加入DPPH,(0.4ml样,2mlDPPH),黑暗处反应半小时后测OD517,不同浓度梯度Vc也做一份,DPPH的清除曲线,做出曲线后清除能力用50%清除率时 浓度表示DP50

如果样品是液体呢,我就是很愁那个样品是液体的,不比固体样品呀
4楼2013-03-16 23:07:26
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manitoniu

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by sunnymen at 2013-03-16 15:19:59
液体样品很好做啊。你配制成不同浓度样品,在加入DPPH,反应半小时后测OD517,让后做一下Vc对DPPH的清除曲线作为对照用。

请问DPPH的浓度要选择多少呢???
7楼2013-03-28 22:30:38
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zhcm2011

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by manitoniu at 2013-03-28 22:30:38
请问DPPH的浓度要选择多少呢???...

我一直用的,0.025mg/mL
9楼2013-03-29 12:01:47
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