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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » SDS-PAGE电泳求助，为什么上面条带清晰，下面不清晰，而且会有条像糊了似的带
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yanny0216

新虫 (小有名气)

[求助] SDS-PAGE电泳求助，为什么上面条带清晰，下面不清晰，而且会有条像糊了似的带 已有1人参与

第一张图片是以前跑得比较正常的，第二张最后变窄了，成了弧状，第三张浓缩胶和分离胶感觉厚薄不一样，且最后面出现了一条3mm左右的带，感觉就像是糊了。。。请问各位高手这都是什么原因引起的呢？小妹感激不尽啊~~

正常的凝胶图.JPG



最下面成了弧状.jpg



最后有条白色的带.jpg
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1楼 2013-03-15 16:43:01
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是上的同一样品吗？检查一下配胶的缓冲液的pH.
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2楼2013-03-16 01:28:29
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yanny0216

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-03-16 01:28:29
是上的同一样品吗？检查一下配胶的缓冲液的pH.

样品是差不多的，缓冲液pH应该是没有问题的，我刚开始也考虑过，所以后来又重新配的制胶的溶液和电泳缓冲液。。。还是没找出问题在哪啊
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3楼2013-03-18 10:12:08
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by yanny0216 at 2013-03-18 10:12:08
样品是差不多的，缓冲液pH应该是没有问题的，我刚开始也考虑过，所以后来又重新配的制胶的溶液和电泳缓冲液。。。还是没找出问题在哪啊...

其实你的胶的质量还算是可以的。第二块胶的marker没有问题，所以我觉得可能是样品里的杂质比较多造成的，比方说多糖、lipids什么的。
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4楼2013-03-18 11:32:46
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lace113

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

是样品里的盐没脱干净，试一下透析或脱盐后重新再跑
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5楼2013-03-21 11:45:22
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chenxiang29

银虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by lace113 at 2013-03-21 11:45:22
是样品里的盐没脱干净，试一下透析或脱盐后重新再跑

不是用pbs悬浮细菌么，怎么脱盐啊
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smile to the world
6楼2013-06-20 09:41:47
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wolfman840

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

杂质很多啊，纯化一下再跑电泳嘛，可以用硫酸铵沉淀了复溶再做。用透析膜透析脱盐。柱层析去杂，好多方法的呢。
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7楼2013-06-20 10:16:42
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毛毛和虫虫

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我跑的和你的第三块胶差不多
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8楼2013-12-17 15:04:11
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槑烦恼

新虫 (初入文坛)
这是真核表达的蛋白结果吗？请问楼主真核表达的蛋白量大不大？
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9楼2018-07-19 17:41:04
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