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[求助]
实时荧光定量 处理不同时间取样 想获取目的基因在胁迫条件下的表达变化
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材料：4摄氏度处理条件下，分别在0,0.5,1,2,3,4,5等时间后取材，提取RNA，反转录cDNA，并以此为模板进行实时荧光定量。 目的：得知目的基因在冷胁迫条件下表达量的变化（相对定量）。 求助： 1、相对定量是否需要做标准曲线？标曲制作时，是不是内参一个反应，目的基因一个反应，不能同时做的么？ 2、以上各个时间段时取材是否应该放在同一个反应板上、同时进行？ 3、如果2是正确的话，那么扩增内参基因的样品选择哪个呢？理论上应该时一个处理时间段的样品的内参、目的基因一起反应，这样内参才具有参考的价值吧~ 我糊涂了~请大神指导！谢谢~ [ Last edited by 桃之夭夭pFly on 2013-3-6 at 15:30 ] |
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