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斑马鱼测定雌激素干扰试验：暴露化合物浓度的确定
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| 最近刚接触内分泌干扰实验，打算用斑马鱼作为受试生物，看到暴露化合物浓度很低，但是又不知道选取的标准，不知哪位大侠肯不吝赐教，小妹在此深表感谢~~~~ |
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yumiao0160
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就是ghlsx所说的那种方法 通过效应来确定浓度 这需要你的浓度设置多跨几个数量级 更关键的就是你的效应终点 举个例子 我手上有一株转有报告基因质粒的细胞 对雌激素类物质敏感 存在化学发光 那么我就设定个浓度梯度把待测物质暴露给这株细胞 酶标仪定量化学发光 对暴露剂量做浓度效应曲线 找到EC50 这个数值就可以作为下一步探讨机制时确定浓度的参考 所以你要做筛选 多找几个endpoint 必要时自己合成biomarker或转导相关报告基因来实现 生物芯片 qsar都可以上 从不同角度筛查 加上初步机制讨论发文章就够了 只了解IC50的话能把细胞毒性说清楚也可以 跟导师讨论下 斑马鱼的卵黄蛋白原就是不错的endpoint 形态学上就可以区分 很经典了 不过出不了太上档次的文章 |
13楼2013-03-13 22:56:25
yumiao0160
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【答案】应助回帖
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没什么特别的标准 先看化合物理化性质确定暴露实验最高浓度也就是溶解度 很多暴露实验直接用溶解度浓度作为暴露浓度 然后看你试验目的 如果针对环境内分泌干扰物的效应 可通过文献调研看水体中浓度范围如何来设定 然后讨论该浓度下影响 如果深入研究效应机制 预实验浓度范围可多跨几个数量级 找到EC50 然后根据最低效应浓度设计实验 至于效应是什么找找文献中相关endpoint 最好是直接就可以看到的 再往下就看你关注什么了 例如干扰激素合成 干扰激素结合受体 干扰激素代谢过程…… 参考相关研究关心的指标即可 这些也适用于环境浓度的研究 |
2楼2013-03-06 18:38:16
3楼2013-03-07 08:55:13
yumiao0160
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4楼2013-03-07 09:54:06