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斑马鱼测定雌激素干扰试验：暴露化合物浓度的确定
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| 最近刚接触内分泌干扰实验，打算用斑马鱼作为受试生物，看到暴露化合物浓度很低，但是又不知道选取的标准，不知哪位大侠肯不吝赐教，小妹在此深表感谢~~~~ |
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yumiao0160
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
幸福般若: 金币+1, ★有帮助, 谢谢啊 2013-03-07 08:52:41
幸福般若: 金币+4, ★★★很有帮助 2013-03-07 18:14:01
TonyGeN: 金币+2, 辛苦了 太热心 欢迎常来环境版交流 2013-03-07 21:43:31
幸福般若: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-03-14 08:39:11
TonyGeN: 金币+3, 您的回帖很精彩 回答的很全面 奖励EEPI一枚 欢迎常来交流 2013-03-14 09:52:48
TonyGeN: EEPI+1, 补上 2013-03-14 09:53:01
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TonyGeN: 金币+3, 您的回帖很精彩 回答的很全面 奖励EEPI一枚 欢迎常来交流 2013-03-14 09:52:48
TonyGeN: EEPI+1, 补上 2013-03-14 09:53:01
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没什么特别的标准 先看化合物理化性质确定暴露实验最高浓度也就是溶解度 很多暴露实验直接用溶解度浓度作为暴露浓度 然后看你试验目的 如果针对环境内分泌干扰物的效应 可通过文献调研看水体中浓度范围如何来设定 然后讨论该浓度下影响 如果深入研究效应机制 预实验浓度范围可多跨几个数量级 找到EC50 然后根据最低效应浓度设计实验 至于效应是什么找找文献中相关endpoint 最好是直接就可以看到的 再往下就看你关注什么了 例如干扰激素合成 干扰激素结合受体 干扰激素代谢过程…… 参考相关研究关心的指标即可 这些也适用于环境浓度的研究 |
2楼2013-03-06 18:38:16
yumiao0160
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4楼2013-03-07 09:54:06
yumiao0160
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首先 严格意义上没有不致死浓度这一说 毒性测试里面用最大耐受剂量（MTD）来表明进行慢性毒性测试的剂量 你可以参考EPA的定义来确定 其次 既然是筛选 建议采用环境浓度与MTD浓度 可适当用梯度浓度考查毒物兴奋效应 否则会被审稿人质疑研究意义 当然看你要投期刊的档次而定 你也可以回避这个问题 直接说我用的浓度是X 且最好你考察的是多种化合物 否则就一种也谈不上筛选 其余的看运气 再次 既然手头有化合物结构 先找个QSAR工具先预测下毒性 省得做无用功 总之 明确研究目的 用梯度浓度筛选逻辑上有问题 任何化合物高浓度都可能会有效应 梯度浓度是用来说明效应变化而不是有没有效应 一个是毒性机制研究一个是风险评价 不一样的思路 |
6楼2013-03-07 17:20:22
yumiao0160
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8楼2013-03-07 18:19:54
yumiao0160
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就是ghlsx所说的那种方法 通过效应来确定浓度 这需要你的浓度设置多跨几个数量级 更关键的就是你的效应终点 举个例子 我手上有一株转有报告基因质粒的细胞 对雌激素类物质敏感 存在化学发光 那么我就设定个浓度梯度把待测物质暴露给这株细胞 酶标仪定量化学发光 对暴露剂量做浓度效应曲线 找到EC50 这个数值就可以作为下一步探讨机制时确定浓度的参考 所以你要做筛选 多找几个endpoint 必要时自己合成biomarker或转导相关报告基因来实现 生物芯片 qsar都可以上 从不同角度筛查 加上初步机制讨论发文章就够了 只了解IC50的话能把细胞毒性说清楚也可以 跟导师讨论下 斑马鱼的卵黄蛋白原就是不错的endpoint 形态学上就可以区分 很经典了 不过出不了太上档次的文章 |
13楼2013-03-13 22:56:25
yumiao0160
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14楼2013-03-13 23:05:10