24小时热门版块排行榜    

查看: 1912  |  回复: 16
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

fushxmy

金虫 (正式写手)

[求助] E.COLI发酵罐出现很奇怪的现象!

我的发酵是产生有机酸的,这几次的发酵很奇怪,种子一接进去之后,很快DO就从100%下降到30%,小于1小时(以前的发酵是至少需要3小时),之后DO时而升到50%以上时而维持在设定的30%左右(反复好几次)。加入IPTG之后,pH开始下降,碱泵开始启动,这个过程只维持了2小时左右,之后pH开始上升并超过设定的7.0,之后pH就不会再下降,直到发酵结束。之后是染过噬菌体,但现在并没有噬菌体出现。我已经转化过好几次菌种,每次都出现同样的问题。不知道是不是培养基的问题,因为我现在的种子是用的2XYT, 16g/l trptone, 10g/l yeast extract, 5 g/L NaCl,以前培养基用的是文献中的。
大家有什么好的建议,谢谢了!

fermentor.jpg
回复此楼
秦皇汉武
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

edoz1986

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

首先确定你的电极有问题不?是否进行校正?都没有问题那就是你的种子液接的太多了。前期生长消耗碳源是会产生酸的,所以pH会下降,后期碳源不足,菌体会产生含氮类的碱性物质,加上菌体自溶,pH会增加,建议在菌体达到一定浓度的时候就收了吧,要想高密度你的培养基不适合,可以在培养基中加入缓冲液。谢谢!
16楼2013-05-24 10:57:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 fushxmy 的主题更新
信息提示
请填处理意见