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meibiyaoa

新虫 (初入文坛)

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[交流] 请问大家过柱子用缓冲液去除杂蛋白一般多长时间？已有4人参与

我纯化溶菌酶，上样后用碳酸氢钠平衡去除杂蛋白，看文献说281紫外分光光度下＜0.1就可以，但是我平衡了4、5个小时，值还是0.3几。有时候还更高些，怎么回事。新人，木有金币。。谢谢各位大虾了

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1楼 2013-01-31 21:54:57

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meibiyaoa

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引用回帖:

4楼: Originally posted by frankstone at 2013-02-02 14:17:14
可考虑 1、基线是否平衡或者检测器是否归零？ 2.不应该用时间衡量，毕竟流速、柱子条件都不一样，主要根据洗脱液的检测，稳定后用柱体积，3、为何用碳酸氢钠平衡去除杂蛋白，一般离子交换柱用低浓度的NaCl。问题描述 ...

1。我是手动测得，肯定归零了。2 这个我得凝胶时自己做的，很有关系，可能胶不好，因为上样过程它还往下沉了。3我是在验证师姐的实验，她用的碳酸氢钠，是亲和法。谢谢啦