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zy1126

铁虫 (小有名气)


[交流] 真菌提取DNA时是要求菌丝还是孢子?

我最近提取的几个样的DNA,刚提来时电泳液能检测到,但是隔了一两天做PCR怎么也做不出来?这是DNA死了吗,这几个样,我是放的时间稍微长一些~
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sofiali

铜虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
菌丝和孢子都可以,新鲜的菌丝要好些,我曾经有一段时间,用菌丝能提出来,并且量很大,但是用菌丝和孢子的混合物提,DNA质量就不好,不过PCR还是没问题的
15楼2013-02-28 20:36:40
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棒哈哈

铁虫 (小有名气)



zy1126(金币+1): 谢谢参与
我以前做用的是菌丝。DNA是不会那么快降解的。PCR 不出结果有多种原因,如果是 DNA 浓度过大,那就稀释一下再用!祝好运
2楼2013-01-30 16:37:08
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zy1126

铁虫 (小有名气)


引用回帖:
2楼: Originally posted by 棒哈哈 at 2013-01-30 16:37:08
我以前做用的是菌丝。DNA是不会那么快降解的。PCR 不出结果有多种原因,如果是 DNA 浓度过大,那就稀释一下再用!祝好运

我就是纳闷啊~我的以前三个样保存的好好的,没有什么问题,就这批的样这种结果,提DNA完了,我都是溶解在30ul的TE里,浓度大也改跑的出啊,不该连条带都没有啊
3楼2013-01-30 16:57:16
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yabing0324

金虫 (职业作家)



zy1126(金币+1): 谢谢参与
菌丝孢子都可以

P不出来原因太多了,看看体系配错没,酶有没有失活,引物常用的话放4度就好了,没必要反复冻融
4楼2013-01-30 21:56:21
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