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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 真菌提取DNA时是要求菌丝还是孢子？
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zy1126

铁虫 (小有名气)

[交流] 真菌提取DNA时是要求菌丝还是孢子？

我最近提取的几个样的DNA，刚提来时电泳液能检测到，但是隔了一两天做PCR怎么也做不出来？这是DNA死了吗，这几个样，我是放的时间稍微长一些~
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1楼2013-01-30 15:20:34
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yuxiangrousi

铜虫 (初入文坛)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
rainwander: 金币+2, 鼓励交流 2013-02-14 21:07:48
用菌丝就可以了  在玻璃纸平皿上可以很方便的手机菌丝 另外DNA不存在什么死不死的问题 可能是你反复冻融讲解掉了 也可能是引物的问题 不过按理说只要DNA提的问题不大 都是很容易扩出目标条带的（在反应体系没有问题的情况下）
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11楼2013-02-01 21:43:26
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棒哈哈

铁虫 (小有名气)
★
zy1126(金币+1): 谢谢参与
我以前做用的是菌丝。DNA是不会那么快降解的。PCR 不出结果有多种原因，如果是 DNA 浓度过大，那就稀释一下再用！祝好运
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2楼2013-01-30 16:37:08
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zy1126

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 棒哈哈 at 2013-01-30 16:37:08
我以前做用的是菌丝。DNA是不会那么快降解的。PCR 不出结果有多种原因，如果是 DNA 浓度过大，那就稀释一下再用！祝好运

我就是纳闷啊~我的以前三个样保存的好好的，没有什么问题，就这批的样这种结果，提DNA完了，我都是溶解在30ul的TE里，浓度大也改跑的出啊，不该连条带都没有啊
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3楼2013-01-30 16:57:16
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yabing0324

金虫 (职业作家)
★
zy1126(金币+1): 谢谢参与
菌丝孢子都可以

P不出来原因太多了，看看体系配错没，酶有没有失活，引物常用的话放4度就好了，没必要反复冻融
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4楼2013-01-30 21:56:21
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