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billy8580

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助DAPI染色

我最近在做拟南芥原生质体,想进行DAPI染色,但总是存在问题,特向各位求助!
原生质体转化,进行培养之后,离心,弃上清,加入DAPI工作液(1mlPBS+1ul 0.5mg/ml dapi),暗培养30min,发现核都能被染上,但是发现原生质体都破了,感觉加入PBS就会使原生质体破碎,不知道为什么?另外,如果不用PBS的话,直接在培养后的原生质体中加入DAPI,染色效果很差,只有破碎的细胞能染色,鲜活的细胞核染不上色,这是为啥?现在很着急呀,请各位出招!谢谢!
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shaquila

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香。期待你的慷慨解囊。快乐每一天鼓励虫子来到生物版块交流,期待你的精彩1 2013-04-29 15:36:44
dapi最好不要做活细胞,原生质体推荐用hoechst 333
2楼2013-04-29 01:26:45
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