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【求助/交流】关于用鬼笔环肽,碘化丙啶染细胞骨架的步骤
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轩辕熊熊
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性别: GG
专业: 骨、关节、软组织损伤与修
[交流]
【求助/交流】关于用鬼笔环肽,碘化丙啶染细胞骨架的步骤
已有2人参与
我准备用鬼笔环肽和碘化丙啶染MG-63的细胞骨架。现在MG-63已经爬好了盖玻片待用,我想具体步骤是不是如下,有哪些地方不妥还请前辈们纠正!
1 PBS清洗细胞2次,每次10分钟;
2 多聚甲醛固定细胞20分钟,PBS清洗细胞2次;
3 用0.3%的Triton X-100处理细胞10分钟;
4 加入5ug/ml的鬼笔环肽室温染色30-60分钟,PBS清洗细胞2次;
5 DAPI染细胞核10分钟,PBS清洗细胞2次;
6 吸去多余水分,加荧光封片液(血清)荧光或共聚焦显微镜下观察。
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让我们学会珍惜....
1楼
2010-05-01 11:58:52
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qiusen120
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专业: 细胞生物学研究中的新方法
★ ★ ★
西瓜(金币+3): 鼓励!可以说得详细些哦~ 2011-05-11 00:23:25
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2楼
2011-05-10 22:23:47
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qiusen120
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专业: 细胞生物学研究中的新方法
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小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖
triton 处理完后一般应该用1%的BSA封闭20min
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3楼
2011-05-11 18:17:55
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wangjiaqi56
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注册: 2012-03-01
专业: 生物化学
★
小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖
请问铺细胞的密度是多少?鬼笔环肽是用DMSO溶解的吗?
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4楼
2012-03-01 21:50:53
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