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轩辕熊熊

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于用鬼笔环肽,碘化丙啶染细胞骨架的步骤已有2人参与

我准备用鬼笔环肽和碘化丙啶染MG-63的细胞骨架。现在MG-63已经爬好了盖玻片待用,我想具体步骤是不是如下,有哪些地方不妥还请前辈们纠正!
  
  1  PBS清洗细胞2次,每次10分钟;
 2  多聚甲醛固定细胞20分钟,PBS清洗细胞2次;
  3 用0.3%的Triton X-100处理细胞10分钟;
 4 加入5ug/ml的鬼笔环肽室温染色30-60分钟,PBS清洗细胞2次;
 5 DAPI染细胞核10分钟,PBS清洗细胞2次;
 6 吸去多余水分,加荧光封片液(血清)荧光或共聚焦显微镜下观察。
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让我们学会珍惜....
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qiusen120

金虫 (小有名气)

★ ★ ★
西瓜(金币+3): 鼓励!可以说得详细些哦~ 2011-05-11 00:23:25
没有封闭
2楼2011-05-10 22:23:47
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qiusen120

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
triton 处理完后一般应该用1%的BSA封闭20min
3楼2011-05-11 18:17:55
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wangjiaqi56

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
请问铺细胞的密度是多少?鬼笔环肽是用DMSO溶解的吗?
4楼2012-03-01 21:50:53
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