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lixuanli

铁虫 (初入文坛)

[求助] sds-page

只能用自己的相机拍，没别的设施

@冼亮淀粉酶
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【分子生物】EPI帖

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1楼 2013-01-18 01:29:05
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+5, MolEPI+1, 鼓励积极发帖帮助解答问题。 2013-01-19 17:56:25
至于你的这个图片，虽然没有上maker，不知道大小，但条带我觉得普遍都挺弥散，这种效果的我也遇到过（见图片），但是我后来将要跑SDS-PAGE的蛋白质样品都加上样缓冲液煮5分钟，将所有制胶所用的试剂都放在4度冰箱，电泳的时候加冰降温，之后的效果就都达到我的要求了（见图片），你也这样试一下吧。预染的maker我也跑过，我觉得效果不好，不知道什么原因，也就不再用了。不过分子量越小的蛋白质跑得越久条带就越弥散是很正常的（看我的图片），可能不是用聚丙烯酰胺，用个别的什么材料来跑会压缩得挺好，因为我要的蛋白质分子量不很小，所以我没有用过。

差.jpg



2012.1.2 4合MonoQ，主2、2、4天，次2、3天，不同天数合疏离前、中、后、合并变性胶.jpg
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
5楼2013-01-19 01:03:51
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普通回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
LZ想问什么呢？
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2楼2013-01-18 07:56:07
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dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
想问些什么啊？我们只能看到图片
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3楼2013-01-18 09:29:36
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秋水素心

银虫 (小有名气)
楼主的图片没看到什么问题啊？
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认真过好每一天！
4楼2013-01-18 17:00:48
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xiaoweiwei121

荣誉版主 (文坛精英)

这潭水蓝的深邃

优秀区长优秀区长优秀版主优秀版主
引用回帖:
5楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2013-01-19 01:03:51
至于你的这个图片，虽然没有上maker，不知道大小，但条带我觉得普遍都挺弥散，这种效果的我也遇到过（见图片），但是我后来将要跑SDS-PAGE的蛋白质样品都加上样缓冲液煮5分钟，将所有制胶所用的试剂都放在4度冰箱， ...

感谢中
maker 最少的是30
左边maker依次是30  40 60 80 100 150 200
只有最后一个个30kDa是预染的，其他的都是跑完之后染的
我要的蛋白也挺大的，70多kDa 就是maker 之后那个泳道的样品
我再重新配一下试剂，试一下你的方法 非常感谢
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6楼2013-01-19 01:09:33
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xiaoweiwei121

荣誉版主 (文坛精英)

这潭水蓝的深邃

优秀区长优秀区长优秀版主优秀版主
引用回帖:
5楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2013-01-19 01:03:51
至于你的这个图片，虽然没有上maker，不知道大小，但条带我觉得普遍都挺弥散，这种效果的我也遇到过（见图片），但是我后来将要跑SDS-PAGE的蛋白质样品都加上样缓冲液煮5分钟，将所有制胶所用的试剂都放在4度冰箱， ...

还有就是 你用的是什么染色呢？
我用的是 blue silver  会和染色方法有关系吗
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7楼2013-01-19 01:11:23
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xiaoweiwei121

荣誉版主 (文坛精英)

这潭水蓝的深邃

优秀区长优秀区长优秀版主优秀版主
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-01-18 07:56:07
LZ想问什么呢？

条带跑的不够平整
不知道 怎么回事
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8楼2013-01-19 01:16:13
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xiaoweiwei121

荣誉版主 (文坛精英)

这潭水蓝的深邃

优秀区长优秀区长优秀版主优秀版主
引用回帖:
4楼: Originally posted by 秋水素心 at 2013-01-18 17:00:48
楼主的图片没看到什么问题啊？

条带跑的不够平整
不知道 怎么回事
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9楼2013-01-19 01:16:22
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
我的是考马斯亮蓝染色
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10楼2013-01-19 01:49:41
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