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lixuanli

铁虫 (初入文坛)

[求助] sds-page

只能用自己的相机拍，没别的设施

@冼亮淀粉酶
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【分子生物】EPI帖

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1楼 2013-01-18 01:29:05
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xiaoweiwei121

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这潭水蓝的深邃

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5楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2013-01-19 01:03:51
至于你的这个图片，虽然没有上maker，不知道大小，但条带我觉得普遍都挺弥散，这种效果的我也遇到过（见图片），但是我后来将要跑SDS-PAGE的蛋白质样品都加上样缓冲液煮5分钟，将所有制胶所用的试剂都放在4度冰箱， ...

感谢中
maker 最少的是30
左边maker依次是30  40 60 80 100 150 200
只有最后一个个30kDa是预染的，其他的都是跑完之后染的
我要的蛋白也挺大的，70多kDa 就是maker 之后那个泳道的样品
我再重新配一下试剂，试一下你的方法 非常感谢
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6楼2013-01-19 01:09:33
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xiaoweiwei121

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5楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2013-01-19 01:03:51
至于你的这个图片，虽然没有上maker，不知道大小，但条带我觉得普遍都挺弥散，这种效果的我也遇到过（见图片），但是我后来将要跑SDS-PAGE的蛋白质样品都加上样缓冲液煮5分钟，将所有制胶所用的试剂都放在4度冰箱， ...

还有就是 你用的是什么染色呢？
我用的是 blue silver  会和染色方法有关系吗
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7楼2013-01-19 01:11:23
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xiaoweiwei121

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这潭水蓝的深邃

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2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-01-18 07:56:07
LZ想问什么呢？

条带跑的不够平整
不知道 怎么回事
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8楼2013-01-19 01:16:13
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xiaoweiwei121

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4楼: Originally posted by 秋水素心 at 2013-01-18 17:00:48
楼主的图片没看到什么问题啊？

条带跑的不够平整
不知道 怎么回事
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9楼2013-01-19 01:16:22
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xiaoweiwei121

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11楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-01-19 07:56:15
条带不平整如果不是胶和电泳的问题的话多半和样品处理不好。因为你的marker也是和样品差不多，所以问题可能是胶做的不好或者是电泳的问题。其实SDS-PAGE对温度没什么严格的要求，如果想快点看结果我都是直接200v跑 ...

有道理，
我重新配一下溶液看一下
非常感谢你的回复
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12楼2013-01-19 08:03:24
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