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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » realtime PCR 两个引物出现两个平台期何解？
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anne0

木虫 (初入文坛)

[求助] realtime PCR 两个引物出现两个平台期何解？

RT，在做realtime PCR的时候，目的基因和内参所到达的平台期不一致，哪位高人知道是怎么回事？
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whatever with the past has gone，the best is always yet to come.
1楼 2013-01-14 21:42:06
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引物开发

捐助贵宾 (初入文坛)
因为，内参基因是管家基因表达量是稳定的，所以应该是最先出现的平台期，然而你做的目的基因扩增效率可能没那么好，他达到平台期的CT值要大一些！
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2楼2013-01-15 16:03:15
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anne0

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 引物开发 at 2013-01-15 16:03:15
因为，内参基因是管家基因表达量是稳定的，所以应该是最先出现的平台期，然而你做的目的基因扩增效率可能没那么好，他达到平台期的CT值要大一些！

平台期不是设定的么 按理来说所有的平台期都是一样的 只是CT值不同 如果平台期也会变 那么CT值就没有什么参考意义了anyway，thank u for your answer.
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whatever with the past has gone，the best is always yet to come.
3楼2013-01-16 10:52:01
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ccharlien

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by anne0 at 2013-01-16 10:52:01
平台期不是设定的么 按理来说所有的平台期都是一样的 只是CT值不同 如果平台期也会变 那么CT值就没有什么参考意义了anyway，thank u for your answer....

设定的是阈值(threshold)，和平台期是两个概念
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4楼2013-01-17 07:02:00
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stewart3261

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励应助 2013-01-17 10:49:26
对于荧光定量来说重要的是阈值，也就是我们所需要的CT值。而平台期这个就不重要了，扩增曲线形状好看点就可以了！
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5楼2013-01-17 09:05:13
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