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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 检测细胞是否生长的方法
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二and亮

新虫 (小有名气)

[交流] 检测细胞是否生长的方法 已有2人参与

我现在做的实验 是用灭菌的河道底泥作为培养基，不加其他东西，投菌，观察细菌能否降低底泥的TOC，个人感觉有些菌在这种条件下不会生长，请问一下用什么办法检测一下比较方便，能快速知道菌是否能生长？？  因为做的比较多，所以力求最简单有效的方法。
谢谢啦。
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1楼 2013-01-08 17:03:46
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mizhoulong

木虫 (著名写手)

环境卫生、微生物学
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
zhang8826857: 金币+3, 鼓励交流 2013-01-11 22:33:26
首先你得确定灭菌的方式会不会影响TOC；

其次底泥也是一个微环境，或者微生态系统，灭菌的过程不可避免的影响了这个微环境，在这个微环境能够生长的细菌离开这个环境后有可能不生长了；

如果用底泥测试新的微生物，首先要大致知道相对具体的方向，如果用广泛的微生物来筛，工作量太大了；

快速知道的话，有几种办法，
1.是ATP测试法，用ATP测试仪能快速判断是否有菌生长及大致浓度，不过环境背景会有干扰；
2.活细菌荧光染色，显微镜下镜检；
分离培养形成菌落，这个不算快但是传统方便靠谱。
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环境卫生、微生物学、卫生应急
2楼2013-01-09 00:23:56
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二and亮

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by mizhoulong at 2013-01-09 00:23:56
首先你得确定灭菌的方式会不会影响TOC；

其次底泥也是一个微环境，或者微生态系统，灭菌的过程不可避免的影响了这个微环境，在这个微环境能够生长的细菌离开这个环境后有可能不生长了；

如果用底泥测试新的微 ...

首先，真是太感谢你的回帖了~~
灭菌方式会不会影响TOC？因为我的底泥都是灭菌过后再进行实验的，所以可以看成一致吧，这个应该不会对我的实验有影响；
然后我老板是要我筛选实验室的几十种菌，工作量不算大~~
想问问你，ATP测试的试剂盒你用过吗？这种底泥悬液的情况能不能测试的？
荧光染色方法 准备试试
非常感谢。
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3楼2013-01-10 15:17:41
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mizhoulong

木虫 (著名写手)

环境卫生、微生物学
ATP法我尝试过便携式检测仪，没用试剂盒法，一个便携式ATP仪在5万人民币左右吧（差不多十年前的报价，最近不知道了），不过这样方法灵敏度高，特异性不强。
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环境卫生、微生物学、卫生应急
4楼2013-01-11 00:26:04
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二and亮

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by mizhoulong at 2013-01-11 00:26:04
ATP法我尝试过便携式检测仪，没用试剂盒法，一个便携式ATP仪在5万人民币左右吧（差不多十年前的报价，最近不知道了），不过这样方法灵敏度高，特异性不强。

你觉得测β-葡萄糖苷酶酶活能反应出微生物活性的变化吗?
主要是不知道β-葡萄糖苷酶是否分泌在胞外
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5楼2013-01-11 15:38:00
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mizhoulong

木虫 (著名写手)

环境卫生、微生物学
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
β-葡萄糖苷酶是一个复合体，由三个酶组成的，其中一个转移酶就是专门转运底物的，可惜参考书不在手边，不过貌似测量这个酶的活性不太可靠。
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环境卫生、微生物学、卫生应急
6楼2013-01-12 00:27:04
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weebug

版主 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
OD600测细菌数，OD280测蛋白值，在生长的各个时间点测这些值。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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天蓝蓝兮日头晒
7楼2013-01-12 08:29:11
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