24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1437  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

will-jiang

金虫 (初入文坛)

[求助] 镍磁珠洗脱蛋白的问题

今天使用镍磁珠提取蛋白,后来跑胶发现目的蛋白是提出来了,可是洗脱液中的蛋白含量很少,说明蛋白还绑在镍磁珠上没有被洗脱下来,请问下这是什么原因呢?是洗脱液和洗涤液的问题么?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fhda142

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
will-jiang: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-01-06 22:03:50
楼上正解,还要注意下elute buffer的PH。
3楼2013-01-06 12:19:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 谢谢分享经验 2013-01-06 05:56:19
will-jiang: 金币+8, ★★★★★最佳答案 2013-01-06 22:03:39
如果elute液中的目的蛋白少,你先要确定目的蛋白是还结合在磁珠上,还是在wash磁珠的时候就损失掉了。你应该有预留组分吧,可以做western检测一下。如果是前者,可以再次elute磁珠或者增加elute buffer中咪唑浓度;如果是后者,需要降低wash buffer中咪唑浓度。
2楼2013-01-06 02:31:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

will-jiang

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-01-06 02:31:45
如果elute液中的目的蛋白少,你先要确定目的蛋白是还结合在磁珠上,还是在wash磁珠的时候就损失掉了。你应该有预留组分吧,可以做western检测一下。如果是前者,可以再次elute磁珠或者增加elute buffer中咪唑浓度; ...

多谢指点~我马上去试验下
4楼2013-01-06 22:03:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

will-jiang

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by fhda142 at 2013-01-06 12:19:56
楼上正解,还要注意下elute buffer的PH。

多谢!
5楼2013-01-06 22:04:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求考研材料调剂 +3 材化李可 2026-04-07 3/150 2026-04-08 00:21 by JourneyLucky
[考研] 0854电子信息319求调剂(接受跨专业调剂) +5 星星不眨眼喽 2026-04-05 6/300 2026-04-07 22:16 by hemengdong
[考研] 复试调剂 +9 春日来信- 2026-04-03 9/450 2026-04-07 15:17 by 尽舜尧1
[考研] 材料调剂 +11 一样YWY 2026-04-07 11/550 2026-04-07 15:13 by shdgaomin
[考研] 316求调剂 +7 yyx想调剂 2026-04-05 7/350 2026-04-07 14:31 by shdgaomin
[考研] 材料与化工363求推荐 +11 zh096 2026-04-04 11/550 2026-04-06 19:14 by guanxin1001
[考研] 专硕304找调剂,一线城市最好 +3 李lsl李 2026-04-05 3/150 2026-04-06 12:16 by ffffjjjj
[考研] 一志愿武汉理工大学080200机械工程308分,求调剂 +4 终不似从前 2026-04-05 4/200 2026-04-06 11:46 by 考研学校招点人
[考研] 315求调剂 +5 &123456789 2026-04-05 5/250 2026-04-05 19:55 by nepu_uu
[考研] 322求调剂 +3 嗯哼哼恒 2026-04-05 3/150 2026-04-05 19:52 by nepu_uu
[考研] 一志愿9材料学硕297已过六级求调剂推荐 +11 adaie 2026-04-04 12/600 2026-04-05 19:04 by 蓝云思雨
[考研] 313求调剂 +5 海日海日 2026-04-04 7/350 2026-04-05 13:58 by imissbao
[考研] 调剂 +3 好好读书。 2026-04-02 3/150 2026-04-05 13:02 by arrow8852
[考研] 0854求调剂 +4 assdll 2026-04-04 4/200 2026-04-05 09:44 by zhq0425
[考研] 320求调剂 +3 一样圆 2026-04-04 3/150 2026-04-04 22:29 by 啵啵啵0119
[考研] 085600调剂 +4 1amJJ 2026-04-02 4/200 2026-04-04 21:53 by hemengdong
[考研] 316求调剂 +9 墨辰_Orion926 2026-04-04 9/450 2026-04-04 21:35 by lbsjt
[考研] 309求调剂 +4 快乐的小白鸽 2026-04-04 5/250 2026-04-04 15:55 by cql1109
[考研] 交通运输考试264分求工科调剂 +4 jike777 2026-04-02 4/200 2026-04-02 21:53 by zllcz
[考研] 348求调剂 +6 吴彦祖24k 2026-04-02 6/300 2026-04-02 14:07 by 给你你注意休息
信息提示
请填处理意见