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木子勇夏

新虫 (小有名气)

[求助] 请教各位大虾 DGGE电泳图哪个参数要改

新手上路,大家多多指教。

DGGE.jpg
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在雨中

金虫 (著名写手)


【答案】应助回帖

引用回帖:
23楼: Originally posted by 木子勇夏 at 2013-01-16 16:18:56
哦,谢谢你这么详细的指教。你们感觉做的挺多的,有没有做过固氮菌的DGGE啊?
我也是用SYBR Green I染色,你的图是反色处理了的是吧?
你说真菌这对引物两处的电压跟时间有点不太一样(70-80v 10-12h and  ...

固氮菌的没有做过。呵呵


电压和时间都大体有个范围的,在范围内一般都做的很好。你可以使用100v  12h。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

24楼2013-01-17 09:20:26
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木子勇夏

新虫 (小有名气)

条带大小业约为200bp,电压 160V 温度58   4.5h
2楼2013-01-05 16:56:12
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elbo

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你的样品是什么?胶的梯度呢?跑的时间太短了,160V怎么也得7个小时吧,细菌的DGGE有人推荐1230V.h这个条件
3楼2013-01-05 19:10:35
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木子勇夏

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by elbo at 2013-01-05 19:10:35
你的样品是什么?胶的梯度呢?跑的时间太短了,160V怎么也得7个小时吧,细菌的DGGE有人推荐1230V.h这个条件

谢谢您哦,细菌的我的这个条件跑得挺好的,这个是真菌的,参照别人的条件,跑出来的效果却是这样的,太不理想了。   胶梯度是10%~35%。
4楼2013-01-06 08:34:58
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