24小时热门版块排行榜    

查看: 962  |  回复: 24

在雨中

金虫 (著名写手)


【答案】应助回帖

引用回帖:
19楼: Originally posted by 木子勇夏 at 2013-01-16 08:28:44
是真不错啊,图很好看,你们都用银染吗?...

Du-Red核酸染料或者SYBR green I

不用银染,好像很难掌握火候。
21楼2013-01-16 09:05:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

在雨中

金虫 (著名写手)


【答案】应助回帖

引用回帖:
20楼: Originally posted by 木子勇夏 at 2013-01-16 08:31:59
我想问下,这电压跟胶的浓度或者是片段大小之间有个什么样的关系啊,是不是片段大,用的电压就低些,或者是其他的呢?有没有一个规律之类的。新接触这领域,不太懂,请赐教。...

对于特定片段长度的,一般是有比较合适的电压和电泳时间的。大概有个范围。

对于细菌V3 338 518这样的200bp左右的,我们一般是70-80V,12h,或者120V,10h

真菌NS1和Fung扩增大概349bp,我们一般选择100V,12h,或者较高一点电压。不过最好不要太大。

细菌341F与907这种做起来,难度大,不过我们也做的很好,我们一般是140V,16-18h,效果很好。
22楼2013-01-16 09:08:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

木子勇夏

新虫 (小有名气)

引用回帖:
22楼: Originally posted by 在雨中 at 2013-01-16 09:08:00
对于特定片段长度的,一般是有比较合适的电压和电泳时间的。大概有个范围。

对于细菌V3 338 518这样的200bp左右的,我们一般是70-80V,12h,或者120V,10h

真菌NS1和Fung扩增大概349bp,我们一般选择100V,1 ...

哦,谢谢你这么详细的指教。你们感觉做的挺多的,有没有做过固氮菌的DGGE啊?
我也是用SYBR Green I染色,你的图是反色处理了的是吧?
你说真菌这对引物两处的电压跟时间有点不太一样(70-80v 10-12h and 100v  12h)?
23楼2013-01-16 16:18:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

在雨中

金虫 (著名写手)


【答案】应助回帖

引用回帖:
23楼: Originally posted by 木子勇夏 at 2013-01-16 16:18:56
哦,谢谢你这么详细的指教。你们感觉做的挺多的,有没有做过固氮菌的DGGE啊?
我也是用SYBR Green I染色,你的图是反色处理了的是吧?
你说真菌这对引物两处的电压跟时间有点不太一样(70-80v 10-12h and  ...

固氮菌的没有做过。呵呵


电压和时间都大体有个范围的,在范围内一般都做的很好。你可以使用100v  12h。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

24楼2013-01-17 09:20:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

木子勇夏

新虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
24楼: Originally posted by 在雨中 at 2013-01-17 09:20:26
固氮菌的没有做过。呵呵


电压和时间都大体有个范围的,在范围内一般都做的很好。你可以使用100v  12h。...

哦,谢谢咯.............
25楼2013-01-18 08:12:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 木子勇夏 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[文学芳草园] 梦想 +5 myrtle 2026-08-26 5/250 2026-08-31 14:40 by hahaboy
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗? +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的? +17 爱看书的可乐 2026-08-26 19/950 2026-08-31 11:51 by xiangy672
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 国社科又开始会评了,不知道这次命运如何 +6 雨打竹帘 2026-08-30 10/500 2026-08-31 09:29 by huixian257
[基金申请] 能否申诉? +6 echo8914667 2026-08-30 7/350 2026-08-31 08:41 by kingkocxr
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已,这评审意见是按照杰青的条件评的吧? +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件,有关系吗? +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 今天务委会开完了,明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
信息提示
请填处理意见