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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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木子勇夏

新虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by xiaowo1127 at 2013-01-10 15:47:43
楼主,你好,我想请教一下,你是做土壤微生物的吗?我是研究这方面的,但是做过很多次,PCR始终不成功,请问楼主能否把你的细菌PCR条件给我看一下呢~~~

细菌的比较容易,你看看这文献可能对你有帮助,我就这么参考的:Characterization of bacterial diversity in two aerated lagoons of a wastewater treatment plant using PCR–DGGE analysis
不过我不用EB染色,对人体伤害太大了。你可以找替代物。
11楼2013-01-11 08:46:02
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木子勇夏

新虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by elbo at 2013-01-07 13:02:33
我同学跑土壤真菌 30-50梯度,你看你DGGE图谱中带没跑开,很可能是胶浓度不对

除了胶浓度改变外,其他的条件是:60度/58度,160v   4.5h 8%的胶吗?
12楼2013-01-11 09:25:55
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elbo

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

60度,80V跑上 13个小时看看吧
13楼2013-01-11 12:56:57
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木子勇夏

新虫 (小有名气)

谢谢。我试试看

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
14楼2013-01-13 11:15:40
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xiaowo1127

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
11楼: Originally posted by 木子勇夏 at 2013-01-11 08:46:02
细菌的比较容易,你看看这文献可能对你有帮助,我就这么参考的:Characterization of bacterial diversity in two aerated lagoons of a wastewater treatment plant using PCR–DGGE analysis
不过我不用EB染色, ...

谢谢您,我仔细看看,不懂得在请教您~~~
15楼2013-01-13 16:40:26
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木子勇夏

新虫 (小有名气)

引用回帖:
15楼: Originally posted by xiaowo1127 at 2013-01-13 16:40:26
谢谢您,我仔细看看,不懂得在请教您~~~...

16楼2013-01-14 08:20:27
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在雨中

金虫 (著名写手)


【答案】应助回帖

我做过几次NS1+GC-Fung的DGGE,这个扩增片段是349bp,我们一般是10-50%的梯度。一般是70-80V,10-12h。建议低电压长时间电泳。
17楼2013-01-15 21:10:47
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在雨中

金虫 (著名写手)


【答案】应助回帖


木子勇夏: 金币+1 2013-05-17 15:20:02
引用回帖:
17楼: Originally posted by 在雨中 at 2013-01-15 21:10:47
我做过几次NS1+GC-Fung的DGGE,这个扩增片段是349bp,我们一般是10-50%的梯度。一般是70-80V,10-12h。建议低电压长时间电泳。

给你看看我们实验室刚做的真菌NS1 和Fung引物扩增的真菌PCR产物的DGGE电泳图。不错吧

DGGE.png

18楼2013-01-15 21:12:44
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木子勇夏

新虫 (小有名气)

引用回帖:
18楼: Originally posted by 在雨中 at 2013-01-15 21:12:44
给你看看我们实验室刚做的真菌NS1 和Fung引物扩增的真菌PCR产物的DGGE电泳图。不错吧

DGGE.png
...

是真不错啊,图很好看,你们都用银染吗?
19楼2013-01-16 08:28:44
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木子勇夏

新虫 (小有名气)

引用回帖:
18楼: Originally posted by 在雨中 at 2013-01-15 21:12:44
给你看看我们实验室刚做的真菌NS1 和Fung引物扩增的真菌PCR产物的DGGE电泳图。不错吧

DGGE.png
...

我想问下,这电压跟胶的浓度或者是片段大小之间有个什么样的关系啊,是不是片段大,用的电压就低些,或者是其他的呢?有没有一个规律之类的。新接触这领域,不太懂,请赐教。
20楼2013-01-16 08:31:59
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